一、培養基用途：
用於艱難梭菌的選擇性分離培養。
二、培養基成分及使用方法：
1.培養基成分
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成分 |
含量（g/L） |
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胰蛋白腖 |
10.0 |
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牛肉浸粉 |
10.0 |
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酵母粉 |
3.0 |
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葡萄糖 |
1.0 |
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可溶性澱粉 |
1.0 |
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氯化鈉 |
5.0 |
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碳酸氫鈉 |
0.4 |
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L-半胱氨酸鹽酸鹽 |
0.5 |
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丙酮酸鈉 |
1.0 |
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L-精氨酸 |
1.0 |
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焦磷酸鹽 |
0.25 |
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果糖 |
6.0 |
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琥珀酸 |
0.5 |
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氯化血紅素 |
0.01 |
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中性紅 |
0.03 |
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瓊脂 |
13.2 |
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pH 7.2±0.2 25℃ |
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2.使用方法
稱取本品 53.20g，加熱溶解於1000ml蒸餾水中，分裝三角瓶，每瓶200mL。121℃高壓滅菌15min，冷卻至45-50℃時，每200mL培養基加入50%卵黃乳液10mL、無菌環絲氨酸0.1g和無菌頭孢西丁3.2mg。混勻，傾入無菌平皿，備用。
三、 原理：
蛋白腖、牛肉浸粉、酵母粉、葡萄糖可溶性澱粉、L-半胱氨酸鹽酸鹽、L-精氨酸、焦磷酸鹽、氯化血紅素、琥珀酸、丙酮酸鈉提供碳源、氮源、維生素和生長因子；果糖為可發酵糖類；氯化鈉維持均衡的滲透壓；中性紅是酸堿指示劑，酸性條件變黃；瓊脂是培養基凝固劑；環絲氨酸和頭孢西丁可抑製雜菌和其他梭菌；50%卵黃乳液可檢驗是否產脂酶，艱難梭菌不產生脂酶故無沉澱環。
四、實驗結果：
1.按使用方法製備培養基，接種以下質控菌株，放置35℃厭氧培養48小時。
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質控菌株 |
菌株編號 |
接種量（CFU） |
生長情況 |
其他特征 |
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艱難梭菌 |
ATCC43593 |
/ |
生長良好 |
黃色菌落，無沉澱環 |
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產氣莢膜梭菌 |
ATCC13124 |
/ |
抑製 |
/ |
2.艱難梭菌在培養基上的生長情況如下圖所示：
圖1-1 CCFA瓊脂培養基微生物質控結果
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