培養基pH的檢測、調整與影響

  培養基的pH是影響培養基性能的重要指標之一，大多數培養基都是有固定的pH範圍，pH的偏離對培養基的指示能力、微生物的生長狀況都有可能產生影響，因此在配製培養基時，pH的檢測、調整和控製也是非常關鍵的。

一、培養基pH的檢測

  早期的培養基標準由於不完善和存在爭議等問題，甚至在不同的文獻或標準中有著不同的範圍，隨著現在標準製定越來越嚴格和完善，目前主流標準中都規定了培養基的pH應該以滅菌後25℃測定結果為準。

  1.液體培養基

液體培養基pH的測定比較簡單，將培養基滅菌後冷卻至25℃時使用pH計測定即可。

  2.固體/半固體培養基

一些培養基因含有瓊脂，滅菌後冷卻至25℃時呈凝固狀態。對於此類培養基的pH測定方法，目前標準中未規定的特別詳細。現在市場上已經有專門用來測定固體培養基pH專用的pH計探頭，若沒有的話，也可使用複合電極檢測（經過實測，使用複合電極插入培養基中測定也能比較準確的反應培養基的pH）。

  注：（1）有些培養基滅菌後需額外補充其他成分，一般來說應以完整培養基的pH測定結果為準。（2）不同的培養基pH受溫度影響會有變化，所以一定要在培養基25℃時進行測定（不建議使用溫度補償功能，會有偏差）。（3）不需要知道培養基的準確pH時，使用pH試紙可以觀察培養基大致的pH值。但要注意，有些培養基因本身帶有顏色或者含有酸堿指示劑，不適合用pH試紙檢測，不同的顏色相互混合會出現其他顏色反應。

二、培養基pH的調整

  現在市場上賣的商品化培養基大多數已經調整好了培養基，無需另外調整。但有時候受滅菌工藝（如不同的滅菌鍋整個加熱時長會有差別，導致滅菌後pH可能偏離，或者更換滅菌方式也會導致pH不在範圍內）或特殊用途等因素需要進行培養基pH的調整，一般可使用1mol/L的鹽酸或氫氧化鈉調整（也可使用蘋果酸、酒石酸、碳酸鈉等進行調整），一般要在滅菌前完成調整。若要在滅菌後進行調整則比較困難，需要使用無菌的酸溶液或堿溶液進行調整。

三、培養基pH對使用效果的影響

  大多數培養基都是有0.2-0.4的波動範圍（如TSB要求pH值為7.3±0.2），對於沒有規定範圍的培養基，一般控製在±0.2範圍內即可。不同的培養基若pH出現偏離，也會有不同的影響。

  對於大多數的培養基來說，pH的少量偏離通常不會造成顯著的不良影響。如TSB要求pH在7.3±0.2，實際上pH即使下降0.1-0.2對使用結果也無顯著影響，這是因為多數微生物的生長範圍是比較寬泛的，並不是一定要在7.1-7.5之間才能生長。但要注意，有些培養基的pH不能偏離過大，特別是以酸堿度進行篩選的培養基或者含有酸堿指示劑的培養基，如TCBS瓊脂要求pH為8.4-8.8，屬於偏堿性的環境，弧菌可以在此培養基上生長，而不耐堿性環境的雜菌則不生長或生長差，若pH偏低則可能導致一些雜菌過多生長，若pH偏高則可能導致弧菌生長不良。此外培養基中含有酸堿指示劑，若培養基的pH不正確，配製出的培養基顏色也會不正確，最終細菌生長後培養基的顏色變化也可能會出現偏差，導致無法準確判斷結果。

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