本文挑選了部分客戶谘詢較多、反饋較多的問題以問答的形式進行答疑。
常見問題1
Q:我們配製培養基為什麽會出現大量沉澱?
A:部分培養基含有較為豐富的無機鹽成分,在加熱和滅菌的過程中很容易發生反應形成沉澱。建議配製培養基時使用去離子水、蒸餾水、純化水,切勿使用普通自來水。但由於各單位使用的去離子水、蒸餾水、純化水實際含有離子程度並不相同(尤其是製水機自製水)在發生此種情況時,可以嚐試使用市麵上的高純度水(如屈臣氏、娃哈哈等品牌水)進行溶解。
我們也發現部分客戶會自行調節pH或者添加額外的營養成分,這些都可能導致培養基突然出現大量沉澱,往往是離子之間發生了複雜的化學反應。
另有部分培養基本身含有不溶於水的物質,如TTB含有大量碳酸鈣,其本身就不能夠完全溶解,此種情況為正常現象,將沉澱搖勻後分裝使用即可。
常見問題2
Q:我們購買的液體培養基,自己加了瓊脂之後滅菌完畢非常渾濁(生長不佳),這是怎麽回事?
A:雖然一般認為瓊脂不提供營養成分,僅作為凝固劑幫助培養基成型。但在實際的生產過程中,由於工藝和來源等原因,瓊脂還是會含有部分糖或其他雜質,這些雜質會一定程度上影響微生物的生長,影響實驗結果的判斷。部分含有雜質較多的瓊脂,滅菌完畢後會與培養基中的離子反應,使得培養基渾濁,隻要不是出現大量沉澱,一般不影響使用。部分客戶自購的瓊脂實際上凝膠強度較高,按照標準添加量,會使得凝固後的平皿凝膠強度過大,影響菌落的生長,這時候會造成菌落生長較小,生長較慢,回收率下降等負麵影響,此時可略微降低瓊脂的添加量。
尤其部分植物組織培養的液體培養基,其含有極為豐富的無機鹽成分,添加瓊脂或其他營養成分時,應慎重考慮,最好先少量實驗,測試生長效果。
常見問題3
Q:為什麽我們購買了你們的幹粉培養基,滅菌完畢以後顏色偏深?
A:大多數培養基都含有豐富的營養成分,如酵母浸粉,葡萄糖,乳糖等,這些糖類、浸粉類成分容易受熱焦化、酸化,絕大多數出現滅菌後顏色過深的情況都是因為滅菌時間過久、溫度過高,滅菌前沒有充分溶解導致的。建議客戶充分加熱溶解培養基後進行分裝,滅菌前確保溶解後的產品沒有明顯的成團或成塊的粉末。其次應嚴格按照瓶身標簽的滅菌溫度和時間進行滅菌,若更改滅菌時間和溫度,客戶應進行工藝驗證。同時應注意滅菌完畢後及時將培養基從滅菌鍋內取出,請勿將培養基長時間悶在滅菌鍋內。
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