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MR-VP生化鑒定管的原理及使用方法

張立鑫
錄入時間:2024-9-13 16:59:52 來源:青島betway必威西汉姆联生物


一、產品用途及原理

  用途:用於大腸埃希氏菌、O157菌、單增李斯特氏菌、腸杆菌科等的生化鑒定。

  添加劑:每盒需配套1盒甲基紅試劑盒HB8280與1盒V-P試劑盒HB8281使用。

  原理:䏡腖提供碳氮源、維生素和生長因子;葡萄糖為可發酵的糖類;磷酸氫二鉀是緩衝劑。

MR實驗中,不同細菌分解葡萄糖的產物不同,大腸埃希氏菌、單增李斯特氏菌可分解葡萄糖產生大量酸,使pH值下降到4.5以下,滴入甲基紅顯紅色,即為MR陽性;產氣腸杆菌產酸較少,滴入甲基紅顯橙黃色。

V-P實驗中產氣腸杆菌、單增李特氏菌分解葡萄糖產生丙酮酸,並使丙酮酸脫羧,生成中性的乙酰甲基甲醇,在堿性溶液中被空氣氧化生成二乙酰,繼續與培養基中的胍基反應生成紅色化合物,即為V-P陽性。


二、培養基配方(g/L)

䏡腖

7.0

葡萄糖

5.0

磷酸氫二鉀

5.0

pH值6.9±0.2(25℃)


三、試驗方法

  1、取適量培養物製備菌懸液,接種於MR-VP生化管中,36℃±1℃培養24h-48h。

  2、甲基紅(MR)試驗

按照甲基紅試劑盒說明書滴加甲基紅試劑,立即觀察結果。鮮紅色為陽性,黃色為陰性。

  3、V-P試驗

  按照V-P試劑盒說明書滴加V-P試劑,充分振搖生化管,觀察結果。陽性反應立刻或於數分鍾內出現紅色,如為陰性,應放在36℃±1℃繼續培養4h再進行觀察。


四、質控結果

  接種以下質控菌株,放置於36℃±1℃需氧培養24h-48h。結果如圖1。

質控菌株

菌株編號

接種量(CFU)

方法

質控結果

大腸埃希氏菌

ATCC 25922

>5000

定性

MR:+(變紅);VP:-

單增李斯特氏菌

ATCC 19114

>5000

定性

MR:+(變紅);VP:+(變紅)

普通變形杆菌

ATCC 13355

>5000

定性

MR:+(變紅);VP:-

產氣腸杆菌

ATCC 13048

>5000

定性

MR:-;VP:+(變紅)

大腸埃希氏菌O157

ATCC 35150

>5000

定性

MR:+(變紅);VP:-

  培養24h:

  培養32h:

  培養40h:

  培養44h:

  培養48h:

  培養52h:

圖1 MR-VP生化鑒定管微生物質控結果

由圖1所示,接種質控菌液後培養24h至52h的生化鑒定結果均相同。


相關產品:


MR-VP培養基-點擊查看產品詳情

甲基紅試劑盒-點擊查看產品詳情

V-P試劑盒-點擊查看產品詳情



注:本文屬betway必威西汉姆联生物原創,未經允許不得轉載。

 

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