嗜冷菌、需氧芽孢數的檢驗-MPC瓊脂

一、定義

  在《NY/T 1331-2007 乳與乳製品中嗜冷菌、需氧芽孢及嗜熱需氧芽孢數的測定》標準中定義，在6.5℃條件下需氧培養10天，在MPC平板上形成可計數菌落的細菌、酵母和黴菌為嗜冷菌，在有氧條件下經80℃加熱處理10min，能存活並且於36℃下培養48h在MPC瓊脂平板上形成可計數的菌落總數。

二、培養基介紹

  在《SN/T 2552.4-2010 乳及乳製品衛生微生物學檢驗方法 第4部分：嗜冷微生物菌落計數》標準中使用培養基為平板計數牛奶瓊脂，在《SN/T 1615-2005 食品和動物飼料中嗜冷微生物計數方法》標準（=ISO17410:2001標準）使用的培養基為平板計數瓊脂基礎加入1g/L的脫脂奶粉，在《NY/T 1331-2007 乳與乳製品中嗜冷菌、需氧芽孢及嗜熱需氧芽孢數的測定》標準中使用培養基為MPC瓊脂，雖然三個標準中培養基的成分名字描述有差異，但實際上配方是完全一樣的，都是用PCA為基礎加入1g/L的脫脂奶粉製成的MPC瓊脂。

三、檢驗方法

  嗜冷菌檢驗：以上三個標準中，嗜冷菌的檢驗方法相同，將樣品處理稀釋後，直接使用MPC瓊脂進行傾注，凝固後置6.5℃培養10天，計數，即為嗜冷菌的檢驗結果。而在《SN/T 2552.4-2010 乳及乳製品衛生微生物學檢驗方法 第4部分：嗜冷微生物菌落計數》標準中還增加了快速法，在21℃培養25±1h後進行計數。此方法最終結果並不是嗜冷菌的總數，但是可以做為參考指標。嗜冷菌的數量與快速法的結果是正相關的，快速計數法的結果數量高低大致可以反映樣品中嗜冷菌是否會超標，這樣就可以提前采取處理措施。

  需氧芽孢數檢驗：與嗜冷菌檢驗樣品處理相比，增加了一步熱處理，將稀釋好的樣品置於80℃加熱10min，此步是為了殺死樣品中的繁殖體，而芽孢有較強的耐熱性則可以存活，加熱結束後迅速用20℃以下流動水冷卻，防止芽孢受到過熱損傷，再使用MPC瓊脂進行傾注，凝固後置36±1℃培養48±2h，計數，計算結果即為樣品中的需氧芽孢數。

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