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在現行的國內外藥典中，胰酪大豆腖液體培養基主要用於藥品的無菌檢查，也可用於微生物限度檢驗（MPN法）、藥品的模擬灌裝試驗、菌種活化等。此培養基營養豐富，同樣也可做為基礎培養基，加入特定成分進行改進，適用於多種微生物的培養（例如加入血液或血清可用於營養苛求型微生物的培養，加入特定的抗生素可用於某些特定菌群的選擇性增菌培養基等，也可加入瓊脂製成固體培養基使用）。
一、TSB的名稱問題
由於不同標準命名和翻譯的問題，導致TSB培養基存在多個名稱，例如胰酪大豆腖液體培養基(Trypticase Soy Broth，TSB)、胰蛋白腖大豆肉湯、胰酪腖大豆肉湯、大豆酪蛋白消化物培養基（Soybean Casein Digest Medium，SCDM）、大豆-幹酪素消化物培養基等，事實上這些培養基都是相同的配方：胰酪腖17.0g/L（用胰酶消化酪蛋白製成，也可以叫胰蛋白腖、酪蛋白腖，酪蛋白主要存在於奶或哺乳動物的肌肉組織中，因此習慣於將牛奶用胰酶消化製成的蛋白腖叫酪蛋白腖，由動物組織經胰酶消化製成的蛋白腖叫胰蛋白腖，這兩種都可以叫胰酪腖），大豆蛋白腖3.0g/L（用木瓜蛋白酶水解大豆製成，因此也叫大豆木瓜蛋白酶水解物、大豆腖），氯化鈉5.0g/L，磷酸氫二鉀2.5g/L，一水合葡萄糖2.5g/L，也就是EP標準、USP標準、CP標準、GB標準等使用的TSB其實是同一個培養基。就連化妝品標準使用的SCDLP培養基，其實也是以TSB為基礎，加入卵磷脂和吐溫80製成的。
二、TSB的微生物質控
TSB靈敏度和適用性檢查：在無菌檢查法部分，質控菌株為枯草芽孢杆菌、白色念珠菌和黑曲黴，培養溫度為20-25℃，接種量不大於100CFU，每株菌接種2個平行管，細菌的培養時間不超過3天，真菌的培養時間不超過5天。而在非無菌產品微生物限度檢查：微生物計數部分，當使用MPN法進行計數時，也用到了TSB，在這一部分也要求對TSB進行檢查，質控菌株為金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、枯草芽孢杆菌，接種量不大於100CFU，培養溫度為30-35℃，接種2個平行管，同時要求接種對照培養基（無菌檢查法部分沒有要求接種對照培養基），培養時間不超過3天。多數人使用TSB都是用於無菌檢查，因此培養基的質量控製規程基本上是按照無菌檢查法部分執行的，並沒有注意到微生物限度檢查部分的質量控製方法。
三、TSB的滅菌
TSB的滅菌方式：可以采用過濾除菌、高壓蒸汽滅菌、輻照滅菌等多種方式均可，但要注意，TSB中含有少量的葡萄糖，特別是高壓蒸汽滅菌時，過度的滅菌條件會導致葡萄糖出現不同程度的焦化，因此再進行滅菌時應提前對滅菌程序進行測試，確保執行的滅菌條件對培養基的質量不會造成不良影響。常見的TSB滅菌後出現顏色變深、變黑、pH下降等現象時，一般都是培養基受熱過度導致，培養基滅菌結束後應及時取出降溫，避免長時間的保溫。
四、TSB的保存
在2015版中國藥典中，製備好的培養基在2-25℃避光條件下，非密閉容器一般在3周內使用，保存在密閉容器中一般在一年內使用。而在2020版藥典中，改為了在2-25℃避光條件下，在驗證的效期內使用。TSB相對比較穩定，因含有少量葡萄糖，長期保存過程中pH會有下降，因此為了延長滅菌後的保存期限，應注意防止滅菌過度，pH可適當上調至7.4-7.5，確保培養基在保存期內的pH不會超出範圍。TSB的靈敏度和適用性通常在一年保存期內不會有明顯的變化。
五、TSB培養基靈敏度和適用性檢查常見問題
在進行TSB的陽性菌接種測試時，經常遇到枯草芽孢杆菌不生長、白色念珠菌不生長，或者黑曲黴不生長的情況。或者做方法驗證時使用洋蔥伯克霍爾德氏菌、銅綠假單胞菌等進行接種測試，也可能遇到不生長的情況。這些情況並不一定是培養基質量的問題，大概率可能是缺氧導致。枯草芽孢杆菌是需氧菌，而白色念珠菌和黑曲黴是真核生物進行有氧呼吸，它們都需要充足的氧氣才能較好的生長，一旦氧氣不足，就可能導致生長緩慢或者不生長的現象出現。
（1）容器：裝TSB的容器，應確保有足夠的空氣。若使用試管裝TSB，最好使用粗一些的試管，裝量通常在1/3左右，一般不超過1/2，使用透氣的矽膠塞。若使用瓶裝，上方應留有一定量的空氣，錐形瓶可以使用透氣塞，輸液瓶培養時也可以在膠塞上插針頭過濾器（一方麵可以有充足的氧氣，另一方麵可能遇到微生物產氣的現象，及時排出氣體防止崩塞）。
（2）振蕩：培養基長時間靜置培養，可能逐漸導致底層氧氣不足，微生物生長緩慢，因此在逐日觀察結果期間，可將TSB輕輕振蕩後再觀察，一方麵可以將沉底的菌體搖起來分散開方便觀察，另一方麵可以使氧氣進入培養基中，有利於微生物的快速生長。
注：本文屬betway必威西汉姆联生物原創，未經允許不得轉載。
