一、培養基的用途及原理
一般用於基因工程大腸杆菌的增菌培養或蛋白表達,也可用於多種細菌的增菌培養。
胰蛋白腖、酵母浸粉提供基本營養,氯化鈉維持滲透壓。此培養基沒有選擇性,營養適宜,因此也常用來活化和培養多種常見細菌,如葡萄球菌、芽孢杆菌、腸道菌等,均可生長良好。但由於培養基中的氯化鈉濃度為1%,高於營養肉湯(0.5%)等一般培養基,某些細菌的生長速度會稍慢一些。
在基因工程大腸杆菌的培養中,LB肉湯是應用最廣泛的培養基之一,它成分簡單,對於大腸杆菌的克隆載體擴增和蛋白的表達及後續的分離純化都很方便。在實際的使用中,常在培養基中加入目標菌攜帶的抗性基因對應的抗生素來達到篩選目標菌和減少雜菌汙染的作用。
二、成分(g/L)
胰蛋白腖 |
10.0 |
酵母浸粉 |
5.0 |
氯化鈉 |
10.0 |
pH |
7.0±0.1 |
三、配製方法
稱取本品25.0g,加熱溶解於1000ml 蒸餾水中,121℃高壓滅菌 15 分鍾,備用。
四、生長現象及結果觀察
接種以下質控菌株,在36±1℃下培養18-24小時:
質控菌株 |
菌株編號 |
接種量/CFU |
生長現象 |
大腸埃希氏菌 |
ATCC25922 |
10-100 |
渾濁 |
大腸埃希氏菌 |
CMCC44102 |
10-100 |
渾濁 |
大腸埃希氏菌 |
DE3(BL21) |
10-100 |
渾濁 |
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