一、培養基用途：

  用於蠟樣芽孢杆菌選擇性増菌培養。

二、培養基成分：

三、原理：

  胰酪腖、植物腖提供氮源，維生素和生長因子；葡萄糖提供碳源；磷酸二氫鉀為緩衝劑；氯化鈉維持滲透壓，添加的抗生素多粘菌素B（2.25萬單位）主要可抑製革蘭氏陰性菌的生長。

四、操作方法

  1、稱取本品30.0g，加熱溶解於1000ml蒸餾水中，分裝至每瓶225ml，121℃高壓滅菌15min，冷卻至50℃左右時，添加1支多粘菌素B（2.25萬單位），搖晃均勻後，分裝試管。

  2、製備工作菌懸液。

  3、接種。

  目標菌（蠟樣芽孢杆菌CMCC(B) 63303）：接種10CFU-100CFU/管，接種體積不超過1mL，接種兩個平型管。同時將1mL菌懸液（與試管同一稀釋度）傾注平板（或適宜稀釋度0.1mL塗布平板）接種兩個平板，做接種量計數用。

  非目標菌（大腸埃希氏菌ATCC 25922）：接種1000CFU-5000CFU/管，接種體積不超過1mL，接種兩個平型管。同時將1mL菌懸液（比待測培養基試管接種小10-100倍稀釋度）傾注平板（或適宜稀釋度0.1mL塗布平板）接種兩個平板，做接種量計數用。

  接種後30±1℃培養24±2小時。

圖一： 胰酪腖大豆多粘菌素肉湯基礎30℃培養24小時後

  30±1℃培養24±2小時後轉接平板。

  目標菌（蠟樣芽孢杆菌CMCC(B) 63303）：吸取10ul培養液均勻塗布或螺旋塗布到MYP平板。

  非目標菌（大腸埃希氏菌ATCC 25922）：吸取10ul培養液均勻塗布或螺旋塗布到非選擇性平板上（如：TSA）。

  4、將轉接後的平板置於30±1℃培養24-48小時。

圖二：試管轉接平板後試驗現象

五、實驗結果

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