HAT培養基

【原理】

  細胞合成DNA有兩條途徑,一條是從頭合成途徑(denove),另一條是應急途徑(salvage)。在從頭合成這條主要途徑被HAT培養液中的葉酸拮抗物A阻斷時,即可借應急通路,利用HAT培養液中的H和T合成DNA。但是，用於融合的小鼠骨髓瘤細胞,已經用過嘌呤類似物8-氮鳥嘌呤或6-巰基鳥嘌呤篩選,均已成為缺乏應急通路所需的次黃嘌呤-鳥嘌呤磷酸核糖轉移酶(HGPRTase)或胸腺嘧啶核苷激酶(TKase)的缺陷型,以致未融合的骨髓瘤細胞或自身融合物,終因無法利用H或T合成DNA而死亡;而脾細胞及其自身融合物,雖有HGPRT酶,卻缺乏於組織培養條件下增殖的能力,一般於2周內自然死亡。唯獨脾細胞與骨髓瘤細胞融合而成的雜交瘤細胞,分別由二親代細胞獲得了應急通路所必須的-HGPRT酶或TK酶和在組織培養條件下生長的能力,而得以在HAT培養液中增殖,最終被選出來。

【成分】

RPMI-1640完全培養基	100ml
HT貯存液	1ml
A貯存液	0.7ml

【製法】

  同HT培養基,再添加0.7mIA貯存液。

【用途】

  篩選雜交瘤細胞。

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