一、產品用途及原理
用途:用於藥品、生物製品需氧菌和厭氧菌的無菌試驗。
原理:蛋白腖和酵母浸出粉提供碳氮源、維生素和生長因子;葡萄糖提供可發酵有糖類更利於生長;L-胱氨酸和硫乙醇酸鈉均能使體係處於低氧化還原電勢,有利於消除菌體生長代謝過程中產生的對自身有害的過氧化物質,同時L-胱氨酸的巰基(-SH)可以中和重金屬的毒性,因此可以用於帶有重金屬物質的無菌檢驗;氯化鈉維持均衡的滲透壓;刃天青作為氧化還原指示劑,氧化態為粉紅色,還原態為無色;少量瓊脂可阻止二氧化碳、氧氣擴散進入培養基中。
二、培養基配方(g/L)
蛋白腖 |
15.0 |
酵母浸粉 |
5.0 |
葡萄糖 |
5.0 |
硫乙醇酸鈉 |
0.5 |
L-胱氨酸 |
0.5 |
氯化鈉 |
2.5 |
刃天青 |
0.001 |
瓊脂 |
0.8 |
pH值7.0-7.2(25℃) |
三、實驗方法
1、稱取本品30.0g,加熱攪拌溶解於1000mL蒸餾水中,分裝試管,每管10mL,121℃高壓滅菌15分鍾。在高壓滅菌後不要立即放至冰箱冷卻,而應在室溫中冷卻。當試管中的培養基有1/3以上變成紅色時不能使用,可通過水浴或蒸汽加熱(僅可加熱一次)去除紅色。
2、製備質控菌液接種到TGC培養基中。
3、放置於30℃-35℃需氧培養24h-72h。
四、結果觀察
接種以下質控菌株,放置於30℃-35℃需氧培養24h-72h,培養結果如圖1所示。
質控菌株 |
菌株編號 |
接種量(CFU) |
生長情況 |
其它特征 |
金黃色葡萄球菌 |
CMCC(B) 26003 |
10-100 |
+++ |
在試管中呈顆粒生長 |
銅綠假單胞菌 |
CMCC(B) 10104 |
10-100 |
+++ |
在試管表層生長,渾濁 |
枯草芽孢杆菌 |
CMCC(B) 63501 |
10-100 |
+++ |
在試管表層生長,渾濁 |
生孢梭菌 |
CMCC(B) 64941 |
10-100 |
+++ |
在試管氧化層以下呈條狀生長 |
產氣莢膜杆菌 |
ATCC 13124 |
10-100 |
+++ |
在試管氧化層以下呈條狀生長 |
圖1 TGC培養基的微生物質控結果
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