一、產品用途及原理

  用途：用於培養豬支原體的基礎培養基。

  原理：PPLO肉湯、腦心浸液、酵母浸粉提供氮源，維生素，氨基酸和生長因子；豬血清提供甾醇、脂質類並補充氨基酸；Hank's平衡鹽維持培養基滲透壓和pH值；苯酚紅為染料；抑菌劑抑製雜菌生長。

二、培養基配方（g/1300mL）

三、試驗方法

  1、稱取本品26.4g，加熱溶解於1300mL蒸餾水中，121℃高壓滅菌15min，冷卻至室溫，無菌操作加入433mL豬血清和1支抑菌劑（含杆菌肽0.25g、青黴素0.25g）並調節pH至7.7±0.1（25℃），混勻，分裝，備用。

  2、製備質控菌株，接種至培養基中，做10倍係列稀釋，稀釋至10-9，並做空白對照。

  3、放置於36℃±1℃恒溫培養箱中，微需氧培養7d-21d。

四、質控結果

  接種以下質控菌株，放置於36℃±1℃恒溫培養箱中，微需氧培養7d-21d。豬肺炎支原體培養至12d的試驗結果如圖1所示。

質控菌株	菌株編號	方法	質控結果	其它特征
豬肺炎支原體	/	定量	生長良好	10-9稀釋度管變黃

圖1 豬支原體培養基培養豬肺炎支原體12d時的試驗結果

五、試驗注意事項  

  1、若使用非一次性試管等容器進行試驗，容器使用前應使用蒸餾水衝洗幹淨，確保無洗滌液等殘留物，以免增加試驗的不確定性或汙染。

  2、滅菌結束後，試管口會有水珠，在進行梯度稀釋時，水珠很容易與空氣中的細菌接觸以致汙染，因此，試管口應灼燒至幹燥，膠塞也需過火，振蕩操作後，若培養基接觸到膠塞，還需再次進行灼燒操作。

  3、調節pH時，使用的酸堿試劑需是無菌的。

  4、支原體培養前應使用封口膜封口，可提供微需氧環境以及降低汙染的風險。

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