動物血清

【原理】

  動物血清是組織培養中用量最大的天然培養基。血清中含有豐富的營養物質,包括大分子的蛋白質和核酸等。血清的種類很多,其中有小牛血清、胎牛血清、馬血清、人胎盤血清等。胎牛血清比較理想,但不易得到,目前采用較多的是小牛血清,國內已有小牛血清出售。

【成分】

  血清、生理鹽水。

【製法】

  (1) 將取血瓶和取血玻璃插管用的乳膠管連接再采血。所有器械都要包裝並高壓蒸汽滅菌；

  (2) 小牛(出生1周歲的)側臥在周定台上，用繩擁牢,剪去頸部毛,用碘酒和酒精消毒；

  (3) 沿氣管中線切開皮膚,小心剝離組織，分離出動脈,用止血謝夾住近心端。後夾住遠心端，中間相距5~7cm，從血管下方穿過兩根線；

  (4) 酒精消毒頸動脈,於遠心三分之二處用眼科剪橫切一小口(勿將動脈剪斷)；

  (5) 把取血插管從切口插入動脈(向近心端)，用小繩牢固紮住插管頭；

  (6) 打開近心端止血鉗,讓血自然流入血瓶內,每頭小牛可取血1500~2000ml；

  (7) 取血瓶傾斜放置2~4小時(室溫)，待血液充分凝固,移入4℃冰箱過夜,讓血清析出；

  (8) 次日吸取上清,以4000rpm,離心30分鍾,收集血清；

  (9) 血清用蔡氏濾菌器過濾除菌,分裝,細菌培養檢查無菌後,置低溫(-20℃)冰箱保存。

【用途】

  促進細胞生長,促進細胞貼壁,保護細胞,解除脂肪酸、胰酶及金屬離子等的毒性作用,使細胞不受傷害。

【注意事項】

  1.取血瓶應預放30ml生理鹽水,以便於血凝塊和瓶壁分離。

  2.放血時不宜太快,以防止溶血。少量溶血的血清仍可用。

  3.不能用碘酒消毒頸動脈,以防酒精混入血清內。

  4.無菌檢查可采用肉湯瓊脂培養基。必要時要進行支原體(PPLO)檢查。

  5.血清使用前需經56℃水浴內放置30分鍾滅活,以消除補體活性。

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