醋酸纖維膜電泳試劑

【原理】

  醋酸纖維膜是由醋酸纖維素製成的均一薄膜，對分子移動無阻力,是免疫球蛋白鑒定的一種簡單快速的電泳方法。血清蛋白在一定的pH下都帶有電荷,由於各種蛋白質的等電點及分子量的不同,所帶的電荷也就各不相同,在直流電場的作用下,它們在醋酸纖維膜上泳動的速度也不一樣,經過一段時間泳動後,即可彼此分開,形成電泳圖譜。

(一)巴比妥緩衝液(pH8.6,離子強度(μ)0.05)

【成分】

5.5二乙基巴比妥鈉	10.3g
5.5二乙基巴比妥酸	1.84g
蒸餾水	1000ml

【製法】

  將以上兩種成分加入蒸餾水中,加熱溶解即可，

【用途】

  蛋白電泳用。

(二)染色液

1.0.05%氨基黑染液

【成分】

氨基黑10B	0.5g
1mol 醋酸	500ml
0.1mol 酸酷鈉	500ml

【製法】

  先將醋酸和醋酸鈉溶液混勻後,再加入氨基黑粉劑,待充分混勻溶解後,即可使用。

2.0.25%氨基黑染液

【成分】

氨基黑10B	1.0g
甲醇	200ml
冰醋酸	40ml
蒸餾水	160ml

【製法】

  先將後3種成分混勻,然後再加入氨基黑混勻溶解後,即可使用。

【用途】

  用於經電泳後之醋酸纖維膜標本的染色。

(三)5%醋酸脫色液

【成分】

甲醇	90ml
醋酸	10ml
蒸餾水	100ml

【製法】

  把以上3種成分混合搖勻後,即可使用。

【用途】

  用於經染色後之醋酸纖維膜電泳標本的脫色。

(四)透明液

【成分】

95%乙醇	7份
冰醋酸	3份

【製法】

  將以上兩種成分混勻後,即可使用。

【用途】

  用於“染過色的醋酸纖維膜電泳標本”的透明。

(五)蛋白洗脫液

【成分】

1N 氫氧化鈉	500ml
0.1N EDTA	50ml
蒸餾水	500ml

【製法】

  將以上3種成分混勻後即可使用。

【用途】

  用於洗脫醋酸纖維膜的蛋白帶。

  注:此液用於洗脫氨基黑染色的蛋白帶,而麗春紅R或S染的蛋白帶則用0.4NNaOH 溶液。

(第二軍醫大學蔡燕剛、吳挹芳編 吳挹芳審)

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