一、培養基用途:
用於誌賀氏菌増菌培養。
二、培養基成分:
成分 |
含量(g/L) |
蛋白腖 |
20.0 |
複合氨基酸 |
2.0 |
牛肉浸粉 |
5.0 |
三號膽鹽 |
4.5 |
檸檬酸鈉 |
4.5 |
硫代硫酸鈉 |
4.5 |
pH 7.2±0.1 25℃ |
三、原理:
蛋白腖,複合氨基酸,牛肉浸粉提供蛋白質,維生素和氨基酸;牛膽鹽為選擇性抑菌劑,抑製革蘭氏陽性菌和部分革蘭氏陰性菌生長,對革蘭氏陰性菌杆菌隻有輕微的抑製能力。
四、操作方法
1、稱取本品40.5g,加熱溶解於1000ml蒸餾水中,分裝試管,121℃高壓滅菌15min。
2、製備工作菌懸液。
3、接種
目標菌(褔氏誌賀氏菌CMCC(B) 51572):接種10CFU-100CFU/管,接種體積不超過1mL,接種兩個平型管。同時將1mL菌懸液(與試管同一稀釋度)傾注平板(或適宜稀釋度0.1mL塗布平板)接種兩個平板,做接種量計數用。
非目標菌(金黃色葡萄球菌CMCC(B) 26305):接種1000CFU-5000CFU/管,接種體積不超過1mL,接種兩個平型管。同時將1mL菌懸液(比待測培養基試管接種小10-100倍稀釋度)傾注平板(或適宜稀釋度0.1mL塗布平板)接種兩個平板,做接種量計數用。
接種後41.5℃±1℃培養16-20小時。
圖一: 誌賀氏菌(BCT)增菌液41.5℃培養18小時後
4、41.5℃±1℃培養16-20小時
目標菌(褔氏誌賀氏菌CMCC(B) 51572):吸取10ul培養液均勻塗布或螺旋塗布到XLD平板。
非目標菌(金黃色葡萄球菌CMCC(B) 26305):吸取10ul培養液均勻塗布或螺旋塗布到非選擇性平板上(如:TSA)。
5、接種後的培養基置於36℃±1℃培養24±2h
圖二:試管轉接平板後試驗現象
質控菌株 |
菌株編號 |
接種量(CFU) |
質量評定標準 |
特征性反應 |
褔氏誌賀氏菌 |
CMCC(B) 51572 |
10-100 |
在XLD上>10CFU |
無色透明菌落 |
金黃色葡萄球菌 |
CMCC(B) 26305 |
1000-5000 |
在TSA上<100CFU |
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