(1)芽孢染色法
①準備染液。
②染色。用芽孢菌製成塗片,幹燥後加熱固定,放一小塊濾紙片,之後滴加數滴石炭酸複紅液,微加熱溫染5min,冷卻後用流水衝洗,用95%酒精脫色2min,水洗,再滴加堿性美藍複染0.5min,水洗,吸幹後鏡檢。
結果:菌體呈藍色,芽孢呈紅色。
(2)改良Schaefferr-Fulton染色法
①製備菌懸液。加1—2滴水於小試管中,用接種環挑取2—3環菌苔於試管中,攪拌均勻,製成濃的菌懸液。
②染色。加孔雀綠染液2—3滴於小試管中,並使其與菌液混合均勻,然後將試管置於沸水浴的燒杯中,加熱染色10—15min。
③塗片固定。用接種環挑取試管底部菌液數環於潔淨載玻片上,塗成薄膜,然後將塗片通過火焰3次溫熱固定。
④脫色。水洗,直至流出的水無綠色為止。
⑤複染。用石炭酸複紅染液染色2—3min,傾去染液並用濾紙吸幹殘液。
⑥鏡檢。幹燥後用油鏡觀察。
結果:芽孢呈綠色,菌體為紅色。
(3)Schaefferr-Fulton染色法
①製片。按常規塗片、幹燥、固定。
②染色。加數滴孔雀綠染液於塗片上,用試管夾夾住載玻片一端,在微火上加熱至染料冒蒸汽並開始計時,染5min。
③水洗。待玻片冷卻後,用緩流自來水衝洗,直至流出的水無色為止。
④複染。用石炭酸複紅染液複染 !%&’。
⑤水洗。用緩流水洗後,吸幹。
⑥鏡檢。幹後用油鏡觀察。
結果:芽孢呈綠色,菌體為紅色。
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