廣義上的組織培養技術包括：器官培養、組織塊培養和細胞培養。目前一般所指的組織培養多指細胞培養。根據細胞的來源、染色體特性和傳代次數的不同可分為：原代和次代細胞培養、二倍體細胞株和傳代細胞係。
1、材料
①無菌玻璃器皿。平皿、吸管、滴管、三角燒瓶、鏈黴素小瓶、膠塞等。
②解剖器材。無菌小剪、鑷子。
③各種溶液。Hanks液、2.5g/l胰酶。細胞生長液 （0.5%水解乳蛋白88ml、雙抗1ml、小牛血清10ml，用5.6%NaHCO3 0.8—1ml調至pH7.2），細胞維持液（0.5%水解乳蛋白95ml、雙抗1ml、小牛血清3ml，用5.6%NaHCO3 0.8—1ml調至pH7.2左右）。
④孵育9—11d雞胚。
⑤其他。血細胞計數器、離心機、水浴箱、消毒棉球等。
2、方法
（1）單層細胞的培養
①取9—11d齡雞胚用碘酒將卵殼消毒後，無菌操作取出雞胚放於平皿內，去頭、爪、內髒及骨骼，用Hanks液洗滌3次，除去殘存血液。
②將組織塊移入鏈黴素小瓶內，用無菌剪刀將雞胚剪碎成0.5—1.0mm3的小塊，用含有雙抗的Hanks液洗滌3次。
③消化。加入5倍量的2.5g/l胰酶，置37℃水浴箱消化15min，用冷Hanks液洗滌1次，除去剩餘的胰酶。
④分散細胞。加入2ml生長液，用毛細管反複吹打，使細胞分散，加適量生長液稀釋細胞懸液。
⑤細胞計數。吸取0.1ml細胞懸液加0.8mlHank液及0.1ml（0.4%）台盼藍染液，混勻後，滴入血細胞計數器內，按白細胞計數法計數細胞數。
⑥細胞分裝與培養。將細胞懸液分至4個小培養瓶中（每瓶1.5ml或根據細胞計數結果，用生長液將細胞稀釋成300000——500000個/ml，加入小培養瓶內，放孵箱37℃培養。24—48h後顯微鏡下觀察，見到生長成片的單層雞胚成纖維細胞。
（2）組織塊培養：Maitland（1928）將雞腎組織剪成小塊懸浮於泰洛液及雞血清中，靜置於37℃培養，這種懸浮培養雖沒有細胞生長，但能供病毒繁殖。 目前此法已不常用，但這種方法簡便，不需胰酶消化，不怕振動，可攜帶至現場應用，並且組織塊培養細胞維持時間較長，可能有利於慢病毒分離。
小組織塊培養可分為懸浮培養和固定培養兩種。
①小組織塊懸浮培養技術
a、將組織剪成0.5—1.0mm3的小塊。
b、Hanks液洗3次，新鮮的組織塊很容易粘貼於玻璃上。
c、按10—15塊組織加入1ml生長液的比例，在試管或瓶中培養。
②小組織塊固定培養技術
a、小組織塊製備同前。
b、將洗液吸幹，加入少量生長液。
c、用毛細管約吸6—10塊小組織塊，分散放在試管壁下1/3最好成一直線。
d、輕輕把細胞管旋轉約180℃，使粘有組織的玻麵向上，溶液流走。
e、加入1ml生長液，不要與組織塊接觸。
f、將細胞管斜放置37℃，此時組織塊在玻璃上麵，生長液在下麵。
g、在前幾天，每天將細胞管輕輕旋轉2，以潤濕組織塊。
h、細胞開始由組織塊長出後，可使生長液浸泡組織塊繼續培養。
（3）器官培養：器官培養不是常規技術，但對某些病毒的分離鑒定有用，如用單層細胞未能分離出的冠狀病毒，利用器官培養就能實現分離。例如，利用正常氣管進行器官培養，纖毛運動即停止，纖毛細胞亦出現病變，最後脫落。有些病毒雖能在氣管培養上繁殖，但對纖毛活動無明顯的影響。
①取5—9個月死胚的氣管組織。
②用含5倍濃抗生素的Hanks液洗3次，將組織包括黏膜和軟骨，用鋒利的刀或剪，剪成2—3mm3的塊。
③在直徑60mm的平皿中放4—6塊，使軟骨在下，纖毛在上。
④加入EagleMEM或199營養液，放5%CO2溫箱培養。
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