培養法最為可靠且成本低廉，但培養周期較長。常用於細胞以及I臨床治療細胞的支原體檢查。
1、所需儀器設備及培養基
（1）儀器設備：培養箱，顯微鏡。
（2）培養基
①支原體肉湯培養基。
②精氨酸肉湯培養基。
③支原體瓊脂培養基。
2、檢查方法
（1）樣品的貯存：樣品如在24h以內進行支原體檢測，則可貯存在2—8℃；如果超過24h，樣品應放置於-20℃以下保存。
（2）檢查支原體：采用支原體瓊脂培養基（半流體）。將樣品分別接種10ml半流體培養基（已冷至36℃），每支培養基接種樣品0.5—1.0ml，至36℃培養21d，每隔1d觀察一次。
3、結果判定：培養結束時，在瓊脂培養基中能看到典型的“彗星狀”和“油煎蛋”狀菌落出現。如已接種培養基均無支原體生長，則檢測樣品合格。如果懷疑有支原體汙染，可取加倍量樣品複試，如果沒有支原體生長，則可視為合格，否則為不合格。
上一篇：細胞培養中支原體汙染的檢測
下一篇：熒光染色法（DNA染色法）檢測支原體
