三、方法
1、增菌及分純將疑為沙門菌感染患者或帶菌者之糞便標本接種至TT增菌液中進行增菌；疑為痢疾患者或帶菌者的糞便標本接種至GN肉湯增菌液中進行增菌，置37℃培養6—8h小時進行增菌。如果根據標本性狀，估計標本中致病菌數量較多，則可省去此步，直接作分純培養，即將標本分別直接劃線接種至麥康凱及SS瓊脂平板等弱強選擇性培養液上，置37℃培養18—24h小時（每一個標本同時接種一個強選擇性培養液和一個弱選擇性培養液）。
2、生化反應鑒定第2日觀察平板上有無可疑菌落，用接種針於上述平板中挑取單個可疑菌落（無色、半透明、光滑、較小）2—3個，分別接種至2—3管雙糖培養液內，置37℃培養18—24h。第3日觀察細菌生長情況，根據表10—2初步鑒定細菌種類，然後取雙糖培養液上 的菌落進行係列生化鑒定。
表 不同腸道細菌在雙糖培養液培養結果（教學實驗模擬標本的結果）
序號 上層（乳糖） 下層（葡萄糖） 動力 可能結果
1 + 有 大腸埃希菌
2 — + 有 傷寒沙門菌
3 — + 無 痢疾誌賀菌
臨床標本的檢測中，根據實驗結果查閱相關資料進行綜一合判定。
3、血清學最終鑒定根據雙糖培養液及係列生化反應結果判斷，最後利用血清學實驗對細菌進行最後的確定。
（1）如果初步鑒定結果為沙門菌屬，則取雙糖培養液斜麵上菌苔與沙門菌多價“O”（A-F組）診斷血清作玻片凝集實驗，如凝集即為沙門菌屬，然後分別與A-F組的單價“O”診斷血清作玻片凝集實驗定組，最後以H因子診斷血清作玻片凝集實驗以定型（種），必要時可用因子診斷血清定型。
（2）如果根據雙糖培養液及係列生化反應結果判斷，初步鑒定結果為誌賀菌屬，則取菌苔與誌賀菌屬多價診斷血清作玻片凝集實驗以定組，必要時可用因子診斷血清定種或型。
【注意事項】
1、若為較典型的沙門菌生化反應，但與A-F組多價“O”診斷血清又不發生凝集反應，應考慮可能為有VI抗原的沙門菌，可將菌製成懸液以100℃加熱30分鍾以除去VI抗原後，再做血清學鑒定。同理，如為較典型的誌賀菌生化反應又不與其多價診斷血清發生凝集，則可用同樣方法加熱100℃1小時以破壞其K抗原，再做玻片凝集反應鑒定之。
2、由於誌賀菌屬常易發生耐藥性變異，所以，臨床上如分離出誌賀菌屬，均應常規做藥物敏感性實驗指導臨床治療工作。
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