臨床標本結核分枝杆菌檢查主要有直接塗片抗酸染色、細菌培養、聚合酶鏈反應（PCR）、抗體檢測、動物接種等多種方法。直接塗片法即取患者標本直接塗片抗酸染色後鏡檢，此法簡便迅速，但要求標本中結核分枝杆菌量多，並要注意與非結核分枝杆菌區別。開放性肺結核患者的痰中常含有結核分枝杆菌，如取痰液直接塗片、染色鏡檢找到抗酸杆菌，可作初步診斷。
【材料】痰標本、載玻片、石炭酸複紅染色液、3%鹽酸乙醇、美藍染色液、金胺染色液、0.5%氫氧化鈉。
【方法】
直接染色法
1、收集患者清晨咳痰，用接種環挑取痰液中幹酪樣壞死小塊或帶血小塊，製成厚塗片，幹燥後火焰固定。
2、用過的接種環須用75%乙醇充分清洗，或放入沸水中煮沸數分鍾，將接種環上的細菌殺死，然後方可在乙醇燈上進行燒灼滅菌；或者先將接種環置乙醇燈火焰旁烘烤片刻，再置於外焰中燒灼滅菌，嚴禁將取標本後的接種環直接放在火焰上滅菌，以防止痰液受熱後突然炸裂，使尚未死亡的結核分枝杆菌隨之播散。
3、將製好的塗片進行抗酸染色或金胺染色。
4、染色後將塗片置油鏡下或熒光顯微鏡下觀察，注意觀察形態、排列方式及染色性。
濃縮集菌法
【報告方式】
1、直接塗片法的報告方式
-：仔細觀察300個視野（觀察時間不少於4分鍾）未發現抗酸杆菌。
+ -：100個視野內發現1—2個抗酸杆菌。
+：100個視野內發現3—9個抗酸杆菌。
+ +：100個視野內發現10—99個抗酸杆菌。
+ + +：每個視野內發現1—9個抗酸杆菌。
+ + + =：每個視野內發現10個以上抗酸杆菌。
2\集菌塗片應按“發現抗酸杆菌”或“未發現抗酸杆菌”方式報告。
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