塗片染色能查到結核分枝杆菌者，一般需要每毫升痰液內含菌量至少500個以上，甚至需達到5萬以上，所以結核患者痰標本直接塗片染色陽性率很低，經濃縮集菌後再進行染色鏡檢可顯著提高檢測的陽性率。
【材料】 結核患者24小時痰液，細口瓶，0.02%酚紅液、汽油或二甲苯，0.5%或4%氫氧化鈉，無菌0.9%氯化鈉溶液等。
【方法】
一、漂浮法
1、取24小時痰液15ml，裝入細口瓶內，加人2倍量0.5%氫氧化鈉搖勻，高壓滅菌或煮沸20—30分鍾殺菌。
2、待冷後加人汽油或二甲苯2ml，用力振蕩20—30分鍾，用0.9%氯化鈉溶液加至液麵與瓶口齊，靜置半小時。
3、取瓶口表麵油狀物塗於載玻片上，微微加熱，幹後再加，如此重複5—6次，至厚度適宜，烘幹待冷，抗酸染色後鏡檢。
二、沉澱法
1、取痰液1份與2倍量4%氫氧化鈉混合，高壓滅菌或煮沸20—30分鍾後，加入0.02%酚紅指示劑0.1ml，劇烈振蕩混勻，亦可置37℃水浴消化30分鍾。
2、校正pH為7.0，3000r/min離心30分鍾，棄去上清液。
3、取沉澱物塗片染色鏡檢。若進行分離培養和動物接種，則應免去高壓滅菌或煮沸的程序。
上一篇：結核患者痰標本抗酸染色
下一篇：結核分枝杆菌抗體的檢測
