炭疽杆菌的幼齡培養物常呈鏈狀排列,在含有低濃度青黴素(0.05—0.5U/ml)的培養中,可以發生形態變異;由於細胞壁的合成被抑製,菌體內部滲透壓高,菌體膨脹為圓球形,並相聯呈串珠狀,而其他需養芽胞杆菌則不出現這種現象,具有較高的鑒別意義。
【材料】
1、青黴素(50—100U/ml)。
2、濾紙條(0.3cm*1.5cm)、載玻片、營養瓊脂。
3、炭疽芽胞杆菌4—6小時肉湯培養物。
【方法】
濾紙片法:取融化後的營養瓊脂傾注平板(厚3cm),待凝固後,用小刀切成1.5cm*3.0cm的瓊脂塊移於載玻片上,用接種環將炭疽芽胞杆菌46小時肉湯培養物均勻地塗布於瓊脂塊表麵,待幹後,用小鑷子取1張0.3cm*1.5cm的滅菌濾紙條,浸以每ml含有50—100U的青黴素液,然後橫貼於瓊脂塊的一端,置於濕盒內,於37℃培養4—6小時取出,加蓋玻片或直接用高倍鏡檢查。在青黴素自然擴散的一定範圍內可見炭疽芽胞杆菌呈串珠狀生長。
2、瓊脂薄片法
(1)取普通瓊脂加熱溶化,按每毫升0.05—0.5U/ml的量加入青黴素,充分搖勻,倒人無菌平皿,其厚度為1mm左右。
(2)待瓊脂凝固後,用消毒小刀切成蓋玻片大小的方塊,平放在潔淨無菌載玻片上。
(3)取新鮮瓊脂斜麵培養物接種於肉湯內,37℃培養6小時左右並振勻的培養物一接種環種於瓊脂小方塊上,把載玻片放平皿中,皿內放一小團濕棉球,蓋上平皿蓋。
(4)37℃溫箱作用2—4小時,取出載玻片,蓋上蓋玻片,用低倍或高倍鏡檢查。
【結果】 炭疽杆菌菌體膨脹為圓球形,並相聯呈串珠狀。
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