不加熱血清反應素實驗采用改良VDRL抗原，即將VDRL抗原用稀釋液稀釋後離心沉澱，於沉澱中加入EDTA、氯化膽堿和防腐劑。EDTA可使抗原在半年內不變性，氯化膽堿可滅活補體等，使用血清可不必加熱滅活。抗原不必每天配製，在4—8℃冰箱中可保存半年。
1、玻片定性實驗
（1）吸取待檢血清（不必滅活）0.05ml，加於玻片的圓圈中，並分散到整個圓圈。用1ml注射器專用針頭吸取抗原，每份待檢標本上滴加1滴，搖動玻片4分鍾，觀察結果。
（2）結果判斷：先用肉眼觀察，再用低倍顯微鏡（放大100倍 ）觀察抗原顆粒或凝集沉澱，按以下方式記錄實驗結果。
-：顆粒細小，分布均勻。
+ -：顆粒分布不規則，或為細小的粗糙物。
+：在顯微鏡下可見小塊狀物，均勻分布。
+ +：肉眼可見小塊狀物，在顯微鏡下可見較大的塊狀物，懸液清亮 。
+ + +∽+ + + +：肉眼可見大或較大的塊狀物。
玻片半定量實驗玻片定性實驗陽性［（+ +）以上］者做半定量實驗，以進一步診斷。先將待檢血清用0.9%氯化鈉稀釋成6個稀釋度，即血清原液1：2、1：4、1：8、1：16、1：32，各取0.05ml稀釋血清加在玻片的圓圈內，按定性實驗方法操作和判定結果。
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