溶脲脲原體（Uu）和人型支原體（Mh）是常見的致病性泌尿道支原體。根據支原體不同生化反應特性和對特定物質的不同抵抗力可用於分離鑒定支原體。
【原理】標本分別接種於支原體鑒別培養液內。溶脲脲原體可產生脲酶，使分糖產氨，培養液呈堿性，指示劑由黃色變為粉紅色。人型支原體能分解精氨酸產氮，使含有精氨酸肉湯培養液呈堿性而呈粉紅色。
【材料】支原體分離鑒定培養液。
【標本采集】標本采集後應立即送檢，室溫保存不超過2小時，2—8℃保存不超過5小時。
男性：用男性無菌拭子插入尿道口內2—4cm處輕輕旋轉取分泌物；也可取前列腺液或精液培養。必要時也可用尿液作支原體培養，取清晨第1次尿的中段尿10—20ml，經2000rpm離心10分鍾，取沉渣接種，但尿液支原體培養陽性率明顯低於尿道分泌物。
女性：用擴陰器擴陰後，用女性拭子在宮頸口內1—2cm處輕輕旋轉取宮頸分泌物；也可用羊水培養。不推薦用尿液。
【培養】
1、培養管複溫取出所需要數量的培養管，複溫至室溫，作好標記。
2、接種將拭子插入培養管，旋轉並擠壓數次，使拭子中支原體滲入液體中，拭子經滅菌處理後妥善處理；尿液沉渣、精液、羊水、前列腺液等液體標本取0.2ml接種培養液，充分混勻。
3、培養35—37℃恒溫培養24—48h小時，觀察結果。
【結果】 Uu應在24小時內報告，Mh應在48小時內報告，其他結果在48小時內報告，最長不超過72小時。培養管液體由橙色變紅色，透明清亮，無明顯渾濁，表明有Uu和（或）Mh生長，可判為陽性；培養管液體無任何變化，可報陰性結果；培養液明顯渾濁變紅者，應判無支原體生長。必要時可做支原體固體培養，低倍鏡下觀察有荷包蛋樣菌落生長者為支原體陽性。
【注意事項】
1、Uu 、Mh生長應保持培養液透明清亮，無明顯渾濁，偶遇渾濁者不得報支原體陽性。
2、Uu生長，培養液正常變色時間在24小時內，但如果標本含量少時，變色時間可能超過24小時。Mh生長，培養液正常變色時間在24—48小時之內，如果標本含量較大時，變色時間可能會小於24小時。
3、不能確定有無雜菌汙染時，可將培養液取出少許接種於血平板或通過0.45um濾膜過濾培養，根據血平板菌落生長或過濾後培養的顏色變化來判斷雜菌汙染。
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