HIV感染早期呈病毒血症時，從病人血液、腦脊液和骨髓細胞中能分離到病毒，從血清中查到HIV抗原；在無症狀的潛伏期內一般不能或很少從外周血中檢測到HIV抗原。當病人進入 AIDS相關綜合征或典型AIDS期，於外周血中均可查到病毒抗原、核酸及抗體。檢測HIV感染者體液中病毒抗原和抗體的方法，操作方便，易於普及應用，其中抗體檢測尤普通。但HIV P24抗原和病毒基因的測定，在HIV感染檢測中的地位和重要性也日益受到重視。
（一）抗體檢測
抗體檢測主要有酶聯免疫吸附試驗（ELISA）和免疫熒光試驗（IFA）。ELISA用去汙劑裂解HIV或感染細胞液提取物作抗原，IFA用感染細胞塗片作抗原進行抗體檢測，由於HIV的全病毒抗原與其他反轉錄病毒有交叉反應，而且病毒是出芽釋放，病毒包膜中可能帶有細胞成分，與人血清中抗HLA也可發生交叉反應，易造成假陽性，如果發現陽性標本應重複一次。為防止假陽性，這類試驗用於篩查抗HIV抗體，陽性者尚需進一步做蛋白印跡法（WB）確證。
WB法是用聚丙烯酰胺凝膠電泳將HIV蛋白進行分離，再經轉移電泳將不同蛋白條帶轉移於硝酸纖維膜上，加入病人血清孵育後，用抗人球蛋白酶標抗體染色，就能測出針對不同結構蛋 白抗體，如抗gp120、gp41、P24抗體，特異性較高。
（二）抗原檢測
用ELISA檢測P24抗原，在HIV感染早期尚未出現抗體時，血中就有該抗原存在。由於P24量太少，陽性率通常較低。現有用解離免疫複合物法或濃縮P24抗原，來提高敏感性。
（三）核酸檢測
用PCR法檢測HIV基因，具有快速、高效、敏感和特異等優點，目前，該法已被應用於HIV感染早期診斷及艾滋病的研究中。
（四）病毒分離
常用正常人外周血液分離單個核細胞，加PHA刺激並培養3—4d後，接種病人血液的單個核細胞、骨髓細胞、血漿或腦脊液，2—3d後，觀察病毒生長情況。如果出現CPE，特別是發現多核巨細胞，說明有病毒增殖。采用IFA法檢測培養細胞中的HIV抗原，或用生化方法檢測培養液中的反轉錄酶活性，也可通過電鏡檢測HIV顆粒。
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