檢驗步驟
6.1前增菌、增菌和分離6.1.1沙門氏菌的前增菌、增菌和分離，按GB/T4789.4進行。6.1.2誌賀氏菌的增菌和分離，按GB/T4789.5進行。6.1.3致瀉大腸埃希氏菌的增菌和分離，按GB/T4789.6進行。6.2噬菌體試驗6.2.1培養基準備營養瓊脂平板（含瓊脂1%——1.5%，瓊脂量視其凝固性而定，約為一般用量的四分之三），每個90mm培養皿中約25ml，放在水平台麵上挨其凝固，翻轉平板，在36℃半開皿倒置約lh，以烘幹培養基表麵水分，並便瓊脂具有顯著的吸水性6.2.2試驗菌液的準備從選擇性鑒別平板上挑取菌落，一般應多挑幾個菌落，以防遺漏。檢驗沙門氏菌時，不俱應挑取乳糖陰性產H2S和不產H2S的菌落，還應挑取乳糖陽性產H2S的菌落。檢驗大腸埃希氏菌時應挑取乳糖陽性或陰性的菌落3個～5個。檢驗誌賀氏菌時應挑取可疑菌落接種三糖鐵瓊脂和葡萄糖半固體管，於36℃培養過夜，次日選取三糖鐵底層產酸、斜麵產堿，不產H2S．不產氣無動力的培養物。下述兩種方法可供選用．6.2.2.1一法：將待試菌落接種於營養肉湯管內，於36℃培養過夜。挑取此肉湯培養物一滿環，稀釋於盛有1mL——2mL蛋白陳水的試管內，使成為（1：200）一（1：400）稀釋菌液，含菌量約為l*l0（6）/mL。
6.2.2.2二法：用接種針在鑒別平板上輕輕蘸取可疑菌落，挑取菌量不宜過多，稀釋於盛有1ml——2mL蛋白陳水的試管內，使其含菌量約與一法相似。6.2.3塗抹試驗菌液6.2.3.1斑點塗抹法：將營養瓊脂平板表麵自圓心起分為三等份．每等份可供塗抹一株細菌培養物，每挑取試驗菌液一滿環，徐抹直徑約1cm的菌斑一個。每株培養物塗抹七個菌斑，外圈四個，內圈三個。6.2.3.2棉簽塗抹法：用無菌棉簽蘸取試驗菌液並略擠去過多液體，在如上瓊脂平板表麵三分之一的區域內塗抹。三個塗抹區之間保持適當距離。略等數分鍾，待菌液幹燥。6.2.4滴加噬菌體 用定量乳頭滴管在一個菌斑上滴加噬菌體一滴，依次為分O-I、C、Sh、E、CE、E4和Ent。滴管上安裝4號針頭，每毫升約為100滴。每支滴管隻滴加一種噬菌體，針尖絕對不能接觸平板表麵，嚴格防止交叉汙染。每用一支滴管，可把全部待試菌應滴加噬菌體的菌斑部位全部滴加完畢。滴加噬菌體時必須將瓊脂平板放在水平台麵土。7種噬菌體滴加完畢後，略等數分鍾，待噬菌體液幹燥。翻轉平板，放36℃ 培養5h一6h，並過夜各觀察一次結果。 如果僅有一兩株培養物作噬菌體試驗，則可用直徑為3mm的接種環挑取噬菌體，依次滴加在菌斑上。灼熱的接種環必須究全冷卻以後方可挑取噬菌體。6.2.5試驗結果的判定 按表1判定噬菌體試驗的結果。必要時吸取少許剩餘的蛋白脈水培養物作靛基質試驗，大腸埃希氏菌培養物一般為靛基質陽性。
6.2.6供快速檢驗沙門氏菌的噬菌體簡化診斷法
采用如下三種噬菌體：
a）沙門氏菌C-I噬菌體
b）E多價噬菌體，包括E和SH
C）C多價噬菌體，包括C、CE、Ent
6 . 3噬菌體不裂解培養物的補充生化試驗
有少數的沙門氏菌培養物不被住工噬菌體裂解，並有少數的大腸埃希氏菌培養物不被相應噬菌體
培養基和試驗菌液的準備同前法。
塗抹試驗菌液：斑點塗抹法將瓊脂平板表麵分為四等份，每等份可供塗抹一株細菌培養物。每株培養物塗抹三個菌斑，外圈兩個，內圈一個。棉簽塗抹法可將試驗菌液在瓊脂平板上塗抹成帶狀，每個平板約可塗抹五條菌帶。略等數分鍾，帶菌斑幹燥。
依次滴加上述三種噬菌體，在36℃培養5—6h和過夜，各觀察一次結果。按表2判定簡化診斷法的結果。
表2 三滴法噬菌體試驗簡化診斷表
O-I E多價 C多價 判定結果
CL - - 沙門氏菌屬
* CL * 大腸埃希氏菌
- - CL 弗勞地氏檸檬酸杆菌a
- - - 噬菌體陰性培養物
注：CL 融合性裂解 ；- 不裂解 ；* 裂解或不裂解 ；a 包括陰溝腸杆菌和少數大腸埃希氏菌。
6.3噬菌體不裂解培養物的補充生化試驗
有少數的沙門氏菌培養物不被O-I噬菌體裂解，並有少數的大腸埃希氏菌培養物不被相應噬菌體裂解，故應將不被各種噬菌體裂解的培養物接種三糖鐵瓊脂，以下分別按GB/T4789.4和GB/T4789.6進行。6.4血清學分型鑒定6.4.1沙門氏菌按GB/T4789.4進行。6.4.2致瀉大腸埃希氏菌按GB/T4789.6進行．6.4.3誌賀氏菌6.4.3.1記錄噬菌體試驗的結果，並按表3判定血清學分型鑒定的方向。Sh噬菌體不裂解的培養物不屬於誌賀氏菌。已知全部誌賀氏菌培養物均能被Sh噬菌體裂解，且將其稀釋至1 RTD時，有的寫的誌賀氏菌培養物仍應被裂解。表3噬菌體試驗的結果和誌賀氏菌血清學分型鑒定的方向
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