附 錄 A
培 養 基 和 試 劑 (補充件)
A1 普通肉湯培養基
成分：
牛肉膏 5.0g
氯化鈉 5.0g
蛋白腖 20.0g
蒸餾水 1000.0mL
製法：將以上成分混合加熱溶化,調至pH7.4～7.6,分裝試管,121℃高壓滅菌30min。
A2 胰蛋白腖大豆肉湯
成分：
胰蛋白腖 17.0g
植物蛋白腖 3.0g
氯化鈉 5.0g
磷酸氫二鉀(K2HPO4) 2.5g
葡萄糖 2.5g
蒸餾水 1000.0mL
製法：將各成分溶於蒸餾水中,必要時加熱使完全溶解,分裝於試管或玻瓶中,121℃ 高壓滅菌15min,最終pH7.3±0.2。
注：製備雙料胰蛋白腖大豆肉湯時,除蒸餾水外,其他成分加倍,配製10％或20％氯化鈉胰蛋白腖大豆肉湯時,可將氯化鈉量增加至所需濃度。
A3 Baird-Parker培養基
成分：
胰蛋白腖 10.0g
牛肉膏 5.0g
酵母膏 1.0g
丙酮酸鈉 10.0g
甘氨酸 12.0g
氯化鋰(LiCl·6H2O) 5.0g
瓊脂 20.0g
蒸餾水 950.0mL
製法：將各成分加於蒸餾水中,加熱煮沸使完全溶解,冷至25℃,調至pH7.0±0.2,分裝每瓶95mL,121℃高壓滅菌15 min,臨用時加熱溶化瓊脂,冷至50℃左右,於每95mL加入預熱至50℃的卵黃亞碲酸鉀增菌劑5mL,搖勻後傾注平皿培養基,應是致密不透明的,使用前在冰箱貯存不得超過48 h。
卵黃亞碲酸鹽增菌劑配製：
將新鮮雞蛋浸泡在適當的HgCl2溶液(1:1000)中約1 min,以無菌操作打開雞蛋,使蛋黃與蛋白分開,將蛋黃加於生理鹽水中(3＋7,V/V)充分搖勻,於50mL蛋黃乳液中加入10mL過濾除菌的1％亞碲酸鉀水溶液,混勻,4±1℃貯存。
A4 甲苯胺藍-DNA瓊脂
成分：
脫氧核糖核酸(DNA) 0.3g
瓊脂 10.0g
氯化鈣(CaCl2無水) 1.1g
氯化鈉 10.0g
甲苯胺藍(O) 0.083g
三羥甲基氨基甲烷 6.1g
蒸餾水 1000.0mL
製法：將三羥甲基氨基甲烷溶解於蒸餾水中,調至pH9.0,除甲苯胺藍(O)外將其餘各項成分加熱使溶解。再將甲苯胺藍(O)溶於培養基中。分裝於塞有橡皮塞的燒瓶中。如立即使用可不需滅菌。已滅菌的培養基在室溫可存放4個月無變化,並經數次熔化後仍可使用。
A5 生理鹽水 成分：
氯化鈉 8.5g
蒸餾水 1000.0mL
製法：將氯化鈉溶於蒸餾水中,分裝於適當容器中,121℃高壓滅菌15 min。
A6 凝固酶試驗兔血漿
臨用時取3.8％(取檸檬酸鈉3.8 g加蒸餾水100 mL,待溶解後過濾,121℃高壓滅菌15min)檸檬酸鈉1份,加入新鮮兔血4份,混勻後放冰箱中使用球沉降(或以3000r/min離心30min)後取上清液進行試驗。
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