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乳酸杆菌分離鑒定技術研究進展——1



錄入時間:2008-12-22 15:58:57 來源:山東大學公共衛生學院

乳酸杆菌 (Lactoba ill  r i n c k)屬於硬壁菌門( Firmicutes) 杆菌綱 (Bacilli) 乳酸杆菌目(Lactobacillales) 乳酸杆菌科 (Lactobacillaceae), 能發酵葡萄糖(或利用碳水化合物) 產生大量乳酸,廣泛分布於環境,特別是動物的消化道、尿道,蔬菜和食品中,具有調節腸道菌群 、 預防或緩解胃腸道疾患、增強機體免疫功能、減少心血管病發病率、降低與酒精中毒性肝 
病相關 的內毒素作用等有益於人體健康的諸多生理功能。 近年來廣泛應用於保健品、藥物、 果汁、糖果、冰淇淋的研發,某些乳酸杆菌尚被用於疾病的輔助治療。2005年初,乳酸杆 
菌共有100個種,而到了2007年則多達12個種。鑒於乳酸杆菌種類的多樣性,來源的多渠道,可用於生產食品類別和形式的廣泛性,食用人群的敏感性等,使乳酸杆菌的安全狀況越來越受到公眾的關注。值得指出的是,乳酸杆菌的作用具有證種內所有菌株均安全,因此正確對乳酸杆菌分離鑒定是保證其產品食用安全性的重要基礎,本文就乳酸杆菌分離鑒定的最新研究進展進行綜述。
1 乳酸杆菌的分離 
從不同的基質中分離乳酸杆菌時,根據乳酸杆菌所在生境的不同以及是否為優勢菌可選擇 不同組分的培養基。目前比較常用的培養基有MRS培養基、 RS MA培養基、番茄汁瓊脂培養基等。  
1.1 MRS培養基 
當乳酸杆菌是待分離區係的優勢菌時,常用MRS培養基對其進行分離。一些常見的食品汙染菌如金黃色葡萄球菌、大腸杆菌等在MRS培養基上生長較差或幾乎不生長,從而減少了雜菌的汙染,降低了分離難度。目前MRS培養基已經成為國標上公認的用於乳酸杆菌分離較好的培養基。常用於從乳酸杆菌發酵製品中分離菌種以及菌種分離後的傳代培養。  
1.2.RSMA培養基 
RSMA培養基是近幾年發展起來用於乳酸杆菌分離的一種非選擇性培養基,由於該培養基中加入0.05%的釘紅染料,因此其最大優點是可以使不同菌種在其表麵生長並形成顏色各異 易於鑒別的菌落。通常情況下,乳酸杆菌在RS MA培養基上形成 黃色菌落,而嗜熱鏈球菌為紫紅色菌落,腸球菌是白色菌落。因此,簡單培養後不用通過常規染色和鏡檢就可以將乳酸杆菌與其他細菌鑒別開來。ELLI等應用RSMA培養基成功的從人糞便樣品中分離出了乳酸杆菌。由於此培養基的營養成分比較單一,所以不適於從菌群組成複雜的環境中分離乳酸杆菌。  
1.3 番茄汁瓊脂培養基 
   這是一種傳統的用於分離乳酸杆菌的培養基,此種培養基由於含有一定量的番茄汁,為乳酸杆菌的生長提供必要的營養,使得乳酸杆菌在此環境下更容易生長。但由於配置過程中需要製備新鮮番茄汁,所以操作起來較為費時費力,目前已逐漸被 MRS等培養基所代替。  
1.4 其他培養基 
   某些選擇性培養基可用於從菌群複雜的基質 (例如腸道) 內進行乳酸杆菌的分離。APT( All  Purpose  Tween) 培養基通常用於從肉製品中分離乳酸杆菌,改良的Rogosa  SL( Rogosa  Sodium  Lactate  Modified ) 完全選擇性培養基則常用於胃腸內容物中乳酸杆 菌的分離。Briggs瓊脂培養基和s L( Sodium Lactate) 培養基常用於酸奶中乳酸杆菌分離。    
   

 

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