9 培養基及試劑
9.1 30 g/L氯化鈉稀釋液
氯化鈉 30.0g;
蒸餾水1000mL
加熱溶解,調至pH7.0,121℃高壓滅菌15 min,以無菌操作分裝於500mL廣口瓶或500mL三角瓶,每瓶450 mL以及17mm×170mm試管,每管9mL,做稀釋樣品用。
9.2 60 g/L 氯化鈉蛋白腖水(PW)
蛋白腖 10.0g
氯化鈉 60.0g
蒸餾水 1000mL
將各成分加熱溶解,調至pH7.2,分裝於17mm×170mm試管,每管10mL。120℃高壓滅菌15min。
9.3 氯化鈉多粘菌素B肉湯(SPB)
酵母浸膏 3.0g
蛋白腖 10.0g
氯化鈉 20.0g
多粘菌素B 250單位/毫升培養基
蒸餾水 1000mL
將各成分(除多粘菌素B外)加熱溶解,稍冷後加入多粘菌素B,調至pH7.4。分裝於17mm ×170mm試管,每管10mL。121℃高壓滅菌15min。滅菌後,立即將培養基取出放涼。
9.4 硫代硫酸鈉、檸檬酸鈉、膽鹽、蔗糖瓊脂(TCBS)
酵母浸膏 5.0g
蛋白腖 10.0g
氯化鈉 10.0g
檸檬酸鈉 10.0g
硫代硫酸鈉 10.0g
膽酸鈉(以牛膽酸鈉代替) 3.0g
牛膽汁粉(以混合膽鹽代替) 5.0g
蔗 糖 20.0g
檸 檬酸鐵 1.0g
瓊 脂 18.0g
溴麝香草酚藍 0.04g
麝香草酚藍 0.04g
蒸餾水 1000mL
除指示劑外,將各種成分加熱溶解,調至pH8.6,加入指示劑。此培養基不必高壓滅菌,煮沸1~2min,待培養基稍涼後傾注平板。 在該平板上,溶藻膠弧菌為黃色菌落,而副溶血性弧菌為藍綠色菌落。腸球菌、變形菌及大腸菌群有時也會生長,但其菌落一般較小,易與副溶血性弧菌區別。
9.5 氯化鈉三糖鐵瓊脂(TSI)
牛肉浸膏 3.0g
蛋白腖 20.0g
乳 糖 10.0g
蔗 糖 10.0g
葡萄糖 1.0g
硫酸亞鐵 0.5g
硫代硫酸鈉 0.5g
氯化鈉 30.0g
瓊 脂 12.0g
酚 紅 0.024g
除瓊脂和酚紅外,將其他成分用蒸餾水400mL微火加熱溶解,同時將瓊脂置於600mL蒸餾水中,浸泡數分鍾後,加熱煮沸使完全溶解。然後將以上兩液混合均勻。調至pH7.4, 加入指示劑混勻,分裝於15mm×0mm試管,每管3~4mL,115℃高壓滅菌15min。滅菌後擺成斜麵,使高層和斜麵各約3cm。
9.6 嗜鹽性試驗用胰腖水(TB)
胰 腖 40.0g
酵母浸膏 12.0g
蒸餾水 4000mL
完全溶解後,分成4份,其中3份分別加入30g、70g、100g氯化鈉,使成0%、30g/L、 70g/L、00g/L不同濃度的氯化鈉胰腖水。調至pH7.5。分裝15mm×150mm試管,每管7mL。 121℃高壓滅菌15min。
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