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我國進出口檢驗行業標準-副溶血性弧菌檢驗方法——3



錄入時間:2008-12-25 11:16:29 來源:青島betway必威西汉姆联生物

9 培養基及試劑 
9.1 30 g/L氯化鈉稀釋液  
氯化鈉 30.0g;  
蒸餾水1000mL  
  加熱溶解,調至pH7.0,121℃高壓滅菌15  min,以無菌操作分裝於500mL廣口瓶或500mL三角瓶,每瓶450 mL以及17mm×170mm試管,每管9mL,做稀釋樣品用。 
9.2 60  g/L 氯化鈉蛋白腖水(PW)  
蛋白腖 10.0g  
氯化鈉 60.0g  
蒸餾水  1000mL   
  將各成分加熱溶解,調至pH7.2,分裝於17mm×170mm試管,每管10mL。120℃高壓滅菌15min。 
9.3 氯化鈉多粘菌素B肉湯(SPB)   
酵母浸膏  3.0g  
蛋白腖 10.0g  
氯化鈉 20.0g  
多粘菌素B 250單位/毫升培養基  
蒸餾水  1000mL   
  將各成分(除多粘菌素B外)加熱溶解,稍冷後加入多粘菌素B,調至pH7.4。分裝於17mm  ×170mm試管,每管10mL。121℃高壓滅菌15min。滅菌後,立即將培養基取出放涼。 
9.4 硫代硫酸鈉、檸檬酸鈉、膽鹽、蔗糖瓊脂(TCBS)   
酵母浸膏   5.0g  
蛋白腖    10.0g  
氯化鈉    10.0g  
檸檬酸鈉   10.0g  
硫代硫酸鈉  10.0g   
膽酸鈉(以牛膽酸鈉代替) 3.0g  
牛膽汁粉(以混合膽鹽代替) 5.0g  
蔗 糖    20.0g  
檸 檬酸鐵   1.0g  
瓊 脂    18.0g  
溴麝香草酚藍 0.04g  
麝香草酚藍  0.04g  
蒸餾水    1000mL   
  除指示劑外,將各種成分加熱溶解,調至pH8.6,加入指示劑。此培養基不必高壓滅菌,煮沸1~2min,待培養基稍涼後傾注平板。  在該平板上,溶藻膠弧菌為黃色菌落,而副溶血性弧菌為藍綠色菌落。腸球菌、變形菌及大腸菌群有時也會生長,但其菌落一般較小,易與副溶血性弧菌區別。 
9.5 氯化鈉三糖鐵瓊脂(TSI)  
牛肉浸膏  3.0g  
蛋白腖   20.0g  
乳 糖    10.0g  
蔗 糖   10.0g  
葡萄糖   1.0g  
硫酸亞鐵  0.5g  
硫代硫酸鈉  0.5g  
氯化鈉   30.0g  
瓊 脂   12.0g  
酚 紅   0.024g  
  除瓊脂和酚紅外,將其他成分用蒸餾水400mL微火加熱溶解,同時將瓊脂置於600mL蒸餾水中,浸泡數分鍾後,加熱煮沸使完全溶解。然後將以上兩液混合均勻。調至pH7.4,  加入指示劑混勻,分裝於15mm×0mm試管,每管3~4mL,115℃高壓滅菌15min。滅菌後擺成斜麵,使高層和斜麵各約3cm。 
9.6 嗜鹽性試驗用胰腖水(TB)  
胰 腖  40.0g  
酵母浸膏 12.0g  
蒸餾水   4000mL   
  完全溶解後,分成4份,其中3份分別加入30g、70g、100g氯化鈉,使成0%、30g/L、  70g/L、00g/L不同濃度的氯化鈉胰腖水。調至pH7.5。分裝15mm×150mm試管,每管7mL。 121℃高壓滅菌15min。    
   

 

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