附錄A 培養基和試劑 (補充件)
A1 月桂基硫酸鹽胰蛋白(月示)(LST)肉湯
胰蛋白(月示)或胰酪腖(Trypticase) 20g
氯化鈉 5.0g
乳糖 5.0g
磷酸氫二鉀(K2HPO4) 2.75g
磷酸二氫鉀(KH2PO4) 2.75g
月桂基硫酸鈉 0.1g
蒸餾水 1000.0mL
將各成分溶解於蒸餾水中。分裝到有倒立發酵管的20mm×150mm試管中,每管10mL。121℃高壓滅菌15min。最終pH6.8±0.2。
A2 煌綠乳糖膽鹽(BGAB)肉湯
蛋白腖 10.0g
乳糖 10.0g
牛膽粉(oxgall或oxbile)溶液 200.0mL
0.1％煌綠水溶液 13.3mL
蒸餾水 1000ml
將蛋白腖乳糖溶於約500mL蒸餾水中,加入牛膽粉溶液200mL(將20.0g脫水牛膽粉溶於200 mL蒸餾水中,pH7.0～7.5),用蒸餾水稀釋到975mL,調pH7.4。再加入0.1％煌綠水溶液13.3mL,用蒸餾水補足到1000mL,用棉花過濾後,分裝到20mm×150mm試管(管內有倒立的小發酵管)中,每管10mL。121℃高壓滅菌15min。最終pH7.2±0.1。
A3 EC肉湯 胰蛋白(月示)或胰酪(月示) 20.0g
3號膽鹽或混合膽鹽 1.5g
乳糖 5.0g
磷酸氫二鉀(K2HPO4) 4.0g
磷酸二氫鉀(KH2PO4) 1.5g
氯化鈉 5.0g
蒸餾水 1000.0mL
將以上成分溶解於蒸餾水中,分裝16mm×150mm試管(管內有倒立的小發酵管),每管8mL。121℃高壓滅菌15min,最終pH6.9±0.1。
A4 伊紅美藍瓊脂(EMB)
蛋白腖 10.0g
乳糖 10.0g
磷酸氫二鉀(K2HPO4) 2.0g
瓊脂 15.0g
伊紅γ(水溶性) 0.4g或2％水溶液20mL
美藍 0.065g或0.5％水溶液13mL
蒸餾水 1000.0mL
在1000mL蒸餾水中煮沸溶解蛋白腖、磷酸鹽和瓊脂,加水補足至原量。分裝於三角燒瓶中。每瓶100mL或200mL,高壓滅菌15min。最終pH7.1±0.2。使用前將瓊脂融化,於每100mL瓊脂中加5mL滅菌的20％乳糖水溶液、2mL的2％伊紅γ水溶液和1.3mL0.5％的美藍水溶液,搖勻,冷至45～50℃傾注平皿。
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