1、主題內容與適用範圍
本標準規定了凍豬肉、凍雞肉、雞蛋黃粉和冰雞蛋白中沙門氏菌屬(包括亞利桑那菌)的檢驗方法。
本標準適用於凍豬肉、凍雞肉、雞蛋黃粉和冰雞蛋白中沙門氏菌屬(包括亞利桑那菌)檢驗。其他食品可參照使用。
2 樣品製備及增菌培養
2.1 肉類
2.1.1 如為冷凍產品,應在45℃以下不超過15 min,或在2～5℃不超過18h解凍。若不能及時檢驗,應置於—15℃左右保存。非冷凍而易腐的食品,置於4℃冰箱保存。
2.1.2 以無菌操作,稱取剪碎後的瘦肉樣品25 g,置於滅菌均質杯內,加入25 mL,緩衝腖水增菌液,以8000～10000r/min均質1 min,移入盛有200mL緩衝腖水增菌液的500mL廣口瓶內,混合均勻,如pH低於6.6,用滅菌1mol/L氫氧化鈉溶液,調pH至6.8±0.2,於37℃水浴培養4h (以增菌液達到37℃時算起),進行前增菌；其後,移取10mL轉種於盛有100mL四硫磺酸鹽煌綠增菌液的250mL玻璃瓶內,搖勻,於42±1℃培養20± 2h,進行選擇性增菌。必要時,同時另稱取25g剪碎的瘦肉樣品,加入25mL亞硒酸鹽胱氨酸增菌液,同樣進行均質。其後,移入盛有200mL亞硒酸鹽胱氨酸增菌液的500mL廣口瓶內,混合均勻,如pH低於6.6, 用滅菌1mol/L氫氧化鈉溶液調pH至6.8±0.2,於37℃培養24±2 h,進行直接選擇性增菌。
2.2 蛋品
2.2.1 冰蛋品(冰雞全蛋、冰雞蛋白、冰雞蛋黃)
2.2.1.1 按2.1.1解凍和保存樣品。
2.2.1.2 以無菌操作稱取樣品25 g,型於盛有225 mL四硫磺酸鹽煌綠增菌液的500mL廣口瓶內,混合均勻,如pH低於6.6,用滅菌1 mol/L氫氧化鈉溶液調pH至6.8±0.2,於37℃培養24±2 h,進行直接選擇性增菌。
2.2.2 幹蛋品(雞全蛋粉、雞蛋白片、雞蛋白粉、雞蛋黃粉)
以無菌操作將樣品碾碎後,稱取25g加入盛有225 mL緩衝腖水增菌液的500 mL廣口瓶內(瓶內事先盛有直徑3～4mm的玻璃珠約50粒),振蕩10min,如pH低於6.6,用滅菌1mol/L 氫氧化鈉溶液調pH至6.8±0.2,於37℃培養20～24h,進行前增菌；其後,移取10 mL轉種於盛有100mL 亞硒酸鹽胱氨酸增菌液的250 mL玻璃瓶內,混勻,於42±1℃培養20±2h,進行選擇性增菌。
3 分離培養
3.1 將增菌培養液搖勻,以無菌操作,用直徑3mm的接種環分別挑取1環,分別劃線於表麵無凝結水的亞硫酸鉍和膽硫乳瓊脂平板各一個(必要時亞利桑那菌瓊脂平板可參照使用), 於37℃培養24±2h。
3.2 觀察各瓊脂平板上有無典型或可疑沙門氏菌屬的菌落,如無典型或可疑菌落,應再繼續培養24±2h。
沙門氏菌屬的菌落特征見表1。
表1 沙門氏菌屬菌落特征
|
|
瓊脂
平板
|
菌 落 特 征
|
沙 門 氏 菌
|
亞 利 桑 那 菌
|
亞硫酸鉍瓊脂
|
棕褐色或灰色至黑色,有時有金屬光澤,周圍培養基呈棕色或黑色,有些菌株呈灰綠色,周圍培養基不變或微變暗
|
黑色,周圍培養基一般不變黑或微變黑。有些菌株呈灰綠色,帶黑心或不帶黑心
|
膽硫乳瓊脂
|
無色半透明有黑色中心或幾乎全為黑色。有些菌株無色半透明中心
|
乳糖陰性菌株,相似於沙門氏菌菌落,乳糖陽性菌株為粉紅色有暗色
|
亞利桑那菌瓊脂
|
黃色有暗藍色中心,周圍培養基中有黃色沉澱物包圍時,菌落緣可為淺黃色
|
粉紅色有黑色中心,有時為全黑色，周圍培養基呈紅色,被發酵衛矛醇或庶糖的細菌
|
上一篇：我國行業標準-出口食品中霍亂弧菌檢驗方法——1,1
下一篇：營養瓊脂培養基——SN 1
