6.5.4 煌綠水溶液
煌 綠 0.5g
蒸餾水 100.0mL
溶解後,存放暗處,不少於1d,使其自然滅菌。
6.5.5 牛膽鹽溶液
牛膽鹽 10.0g
蒸餾水 100.0mL
加熱煮沸至完全溶解,高壓滅菌121℃,20 min。
6.5.6 製備
基礎液 900.0mL
硫代硫酸鈉溶液 100.0mL
碘溶液 20.0mL
煌綠水溶液 2.0mL
牛膽鹽溶液 50.0mL
臨用前,按上列順序,以無菌操作依次加入基礎液中,每加入一種成分,均應搖勻後再加入另一種成分。最後分裝於滅菌玻璃瓶內,每瓶100mL或225mL。
6.6 亞硫酸鉍瓊脂(BS)
蛋白腖 10.0g
牛肉膏 5.0g
葡萄糖 5.0g
硫酸亞鐵 0.3g
磷酸氫二鈉 4.0g
煌 綠 0.025g或5g/L水溶液5mL
檸檬酸鉍銨 2.0g
亞硫酸鈉 6.0g
瓊 脂 18.0g
蒸餾水 1000.0mL
將前三種成分加入300 mL蒸餾水中(製作基礎液),硫酸亞鐵和磷酸氫二鈉分別加入 20mL和30mL蒸餾水中,檸檬酸鉍銨和亞硫酸鈉分別加入另一20mL和30mL蒸餾水中,瓊脂加入600mL蒸餾水中。然後分別攪拌均勻,靜置約10min,加熱煮沸至完全溶解。冷至80℃ 左右時,先將硫酸亞鐵和磷酸氫二鈉混勻,倒入基礎液中,混勻。將檸檬酸鉍銨和亞硫酸鈉混勻,倒入基礎液中,再混勻。調至pH7.5±0.1,隨即傾入瓊脂液中,混合均勻,冷至 50～55℃。加入煌綠溶液,充分混勻後立即傾注平皿,每皿約20mL。
本培養基不需要高壓滅菌,在製備過程中不宜過分加熱,避免降低其選擇性,新配製的培養基呈玉白色不透明,貯於室溫暗處,超過48h會降低其選擇性,本培養基宜於當天製備,第二天使用。
6.7 膽硫乳瓊脂(膽鹽 硫化氫 乳糖瓊脂 DHL)
蛋白腖 20.0g
牛肉膏 3.0g
乳 糖 10.0g
蔗 糖 10.0g
牛膽鹽 2.0g
硫代硫酸鈉 2.2g
檸檬酸鈉 1.0g
檸檬酸鐵銨 1.0g
中性紅 0.03g或5g/L水溶液6mL
瓊 脂 16.0g
蒸餾水 1000.0mL
除中性紅和瓊脂外,將其他成分加入400 mL蒸餾水中,攪拌均勻,靜置約10 min,加熱煮沸至完全溶解,調至pH7.3±0.1。另將瓊脂加入600mL蒸溜水中,攪拌均勻,靜置約 10min,加熱煮沸至完全溶解。將兩種溶液混合後,再加入5g/L中性紅水溶液6mL,攪拌均勻,冷至50～55℃,傾注平皿,每皿約20mL。
本培養基不需高壓滅菌,也不再進行任何加熱。製成的平板為橙黃色。
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