1 主題內容與適用範圍
本標準規定了用4-甲基傘形酮辛酯試劑快速檢驗出口食品中沙門氏菌的方法。
本標準適用於出口肉品、蛋品沙門氏菌的檢驗,其他食品可參照使用。
2 引用標準SN 0170 出口食品中沙門氏菌(包括亞利桑那菌)檢驗方法
3 符號MUCAP:4-methylumbelliferyl-caprylate(4-甲基傘形酮辛酯)的縮寫。MUCAP:試劑:用4-甲基傘形酮辛酯配成的試劑的縮寫。SS瓊脂:沙門氏菌和誌賀氏菌瓊脂培養基。HE瓊脂:Hektoen Enteric 瓊脂培養基。
4 設備與材料
4.1 紫外光燈:波長366 nm,功率≥6W。
4.2 放大鏡:3~4X。
4.3 毛細滴管。
5 培養基與試劑培養基與試劑按 SN 0170 第5章,另補充以下部分:
5.1 SS瓊脂培養基(含1%蔗糖):見附錄 A1。
5.2 HE瓊脂培養基:見附錄 A2。
5.3 MUCAP試劑:見附錄 A3。
5.4 氧化酶試紙:見附錄 A4。
6 樣品製備及增菌培養參照SN 0170進行。
7 分離培養
7.1 將增菌培養液搖勻,挑取一接種環,劃線接種於SS和HE瓊脂培養基各一個,於36±1℃培養 24±2h。
7.2 觀察各瓊脂平板上有無可疑沙門氏菌菌落。如無可疑菌落,應再繼續培養24±2h。沙門氏菌的菌落特征見表 1。
表 1 沙門氏菌屬菌落特征
培養基 菌 落 特 征
SS平板 圓形,邊緣整齊;淡黃色,半透明,有或無黑色中心;周圍培養基透明淡黃色
HE平板 圓形,邊緣整齊;藍綠色至藍色,有或無黑色中心;周圍培養基透明墨綠色
8 測定
8.1 從培養的分離培養基上選可疑沙門氏菌菌落(盡量選較大、分離較好的單個菌落),用玻璃筆做好標記並編號。
8.2 用毛細滴管吸取 MUCAP試劑,加一滴於編號的菌落上。待一個平板的被檢菌落全部滴加試劑後,將平板拿至366nm紫外光燈下檢視。發藍色熒光的為 MUCAP試驗陽性,將陽性菌落號記錄下來。
8.3 用接種環挑取熒光反應陽性菌落,塗於氧化酶試紙上,觀察塗菌點是否變藍色。於10min內變藍色為氧化酶試驗陽性;不變色為陰性。
9 結果的報告
9.1 MUCAP試驗陰性的樣品,報告為“未檢出沙門氏菌”
9.2 MUCAP試驗陽性氧化酶試驗陰性的樣品,按SN 0170第四章繼續進行生化和血清學試驗,並根據試驗結果報告。
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