6.操作步驟
6.1增菌以無菌操作取檢樣25g（ml)，加入裝有225mLGN增菌液的廣口瓶內，固體食品用均質器以8000r/min一10000r/min打碎1min，或用乳缽加滅菌砂磨碎，粉狀食品用金屬匙或玻璃棒研磨使其乳化，於36℃培養6——8h。培養時間視細菌生長情況而定，當培養液出現輕微混濁時即應中止培養。
6.2分離和初步生化試驗
6.2.1取增菌液1環，劃線接種於HE瓊脂平板或SS瓊脂平板一個；另取1環劃線接種於麥康凱瓊脂平板或伊紅美藍瓊脂平板一個，於36℃培養18h——24h，誌賀氏菌在這些培養基上呈現無色透明不發酵乳糖的菌落。
6.2.2挑取平板上的可疑菌落，接種三搪鐵瓊脂和葡萄糖半固體各一管。一般應多挑幾個菌落，以防遺漏，經36℃培養18h——24h，分別觀察結果。
6.2.3下述培養物可以棄去：a）在三糖鐵瓊脂斜麵上呈蔓延生長的培養物；b）在18h——24h內發酵乳糖、蔗糖的培養物；c）不分解葡萄糖和隻生長在半固體表麵的培養物；d）產氣的培養物．e）有動力的培養物；f）產生硫化氫的培養物。
6.2.4凡是乳糖、蔗糖不發酵，葡萄糖產酸不產氣（福氏誌賀氏菌6型可產生少量氣體），無動力的菌株，可做血清學分型和進一步的生化試驗。
6.3血清學分型和進一步的生化試驗
6.3.1血清學分型挑取三糖鐵瓊脂上的培養物，做玻片凝集試驗。先用四種誌賀氏菌多價血清檢查，如果由於K抗原的存在而不出現凝集，應將菌液煮沸後再檢查；如果呈現凝集，則用Al、AZ、B群多價和D群血清分別試驗。如係B群福氏誌賀氏菌，則用群和型因子血清分別檢查。福氏誌賀氏菌各型和亞型的型和群抗原見表1。可先用群因子血清檢查，再根據群因子血清出現凝集的結果，依次選用型因子血清檢查。4種誌賀氏菌多價血清不凝集的菌株，可用鮑氏多價1、2、3分別檢查，並進一步用1——15各型因子血清檢查。如果鮑氏多價血清不凝集，可用痢疾誌賀氏菌3～工2型多價血清及各型因子血清檢查。
6.3.2進一步的生化試驗在做血清學分型的同時，應做進一步的生化試驗，即：葡萄糖錢，西蒙氏檸檬酸鹽，賴氨酸和鳥氨酸脫梭酶，pH7.2尿素，氰化鉀（KCN）生長，以及水楊苷和七葉苷的分解。除宋內氏菌和鮑氏13型為烏氨酸陽性外，誌賀氏菌屬的培養物均為陰性結果。必要時還應做革蘭氏染色檢查和氧化酶試驗，應為氧化酶陰性的革蘭氏陰性杆菌。生化反應不符合的菌株，即使能與某種誌賀氏菌分型血清發生凝集，仍不得判定為誌賀氏菌屬的培養物。已判定為誌賀氏菌屬的培養物，應進一步做5％乳糖發酵，甘露醇、棉子糖和甘油的發酵和靛墓質試驗。誌賀氏菌屬四個生化群的培養物，應符合該群的生化特性。但福氏6型的生化特性與A群或C群相似。
上一篇：食品衛生微生物學檢驗誌賀氏菌檢驗1——GB
下一篇：食品衛生微生物學檢驗致瀉大腸埃希氏菌檢驗1——GB
