6.操作步驟
6.1樣品的采集及處理食物樣品采集後應盡快進行檢驗。如果樣品必須運送和保存，應使用Cary一Blair半固體培養基。彎曲菌的存活時間取決於溫度，在25℃情況下，其存活時間不到24h或更短，因此樣品在原始分離前需放冰箱或冷處保存。
6.2微需氧條件的製備最佳微需氧條件是氧氣為5％、二氧化碳為10％、氫氣為85％。
6.2.1帶有雙相壓力計（可表示正負壓的）厭氧罐：在裝皿密封後，先抽去罐內空氣至負壓7300Pa( 550mmHg）處，輸人上述三種混合氣體使罐內壓力恢複於零；再將罐內氣體抽至負壓7300Pa( 550mmHg）同樣輸人上述氣體至零，即可放置溫箱培養。
6.2.2氣袋法：操作時隻使用氣體發生劑而不加催化劑。
6.2.3雙平板法：取兩塊平板，一塊平板接種已知的兼性厭氧菌（如變形杆菌），另一塊平板接種樣品，去掉皿蓋，將含瓊脂的兩隻皿相對合齊並用膠布粘封，放人密封不漏氣的罐內（或袋內）進行培養。由於兼性厭氧菌生長的代謝作用，可使小環境中的氧氣濃度下降和二氧化碳濃度上升。
6.2.4蠟燭缸法：將已接種細菌的平板置於容量2000mL的磨口標本缸或千燥器內。缸蓋及缸口塗以凡士林，放人小段點燃蠟燭於缸內（勿靠近缸壁，以免烤熱缸壁而炸裂），蓋密缸蓋。缸內燃燭約0.5——1min，因氧減少自行熄滅，此時容器內約含二氧化碳5％——10%。最後連同容器一並置於42℃士1℃ 箱中培養。
6.3分離培養
6.3.1拭子或液體可直接在選擇性培養基如改良Camp一BAP布氏杆菌培養基或使用Skirrow氏培養基平板上劃線接種。於42℃ 養48h後，觀察可疑菌落。
6.3.2第一型菌落不溶血，灰色、扁平、濕潤、有光澤，看上去像水滴，有從接種線向外擴散的傾向；第二型菌落也不溶血，常呈分散凸起的單個菌落（直徑為1mm，邊緣完整、發亮）。
6.4初步鑒定將可疑菌落做氧化酶和過氧化氫酶試驗，如為陽性，則塗片做革蘭氏染色。本菌為革蘭氏明性菌，大小為（0.3um——0.4um）*（1.5um——3um），呈S形、螺旋狀或紡錘形。在固體培養基上培養時間過久或在不適條件下則常呈現球形菌。在暗視野或相差顯微鏡下觀察，動力明顯。根據菌落生長特征、菌體染色、動力、氧化酶和過氧化氫酶試驗陽性者，可初步確定為彎曲菌。
6.5確定鑒定經初步鑒定後，仍需做下述試驗（以下各項試驗均需在5％氧氣的微需氧環境中培養）。
6.5.1甘氨酸耐受性試驗：接種於甘氨酸培養基中，培養48h。如為陽性，在培養基表麵有雲霧狀生長，則為彎曲菌空腸亞種。
6.5.2硫化氫生長試驗：接種子T魷斜麵上，並吊一根乙酸鉛濾紙條於管口，培養物經48h——72h培養，空腸彎曲菌一般在斜麵上少量生長，其反應為堿性／堿性（K/K），濾紙條變黑，但培養基底部不因硫化氫而變黑。
6.5.3對3.5%氯化鈉的耐受性試驗：接種於3.5％含鹽肉湯培養基，經48h培養，空腸彎曲菌不生長。
6.5.4 42℃和25℃生長試驗：將培養物接種於兩管布氏肉湯中，一管放於42℃ 一管放於25℃培養48h，42℃ 長而25℃不生長者，則為空腸彎曲菌。
6.5.5馬尿酸鈉水解試驗：將培養物接種於馬尿酸鈉培養基，於42℃ 養48h，離心沉澱取出部分上清液。加入三氯化鐵試劑，如出現恒久沉澱物則為陽性，空腸彎曲菌呈陽性反應。6.5.6萘啶酸試驗：將可疑空腸彎曲菌塗布接種於血平板上，然後貼上含30ug萘啶酸的濾紙於平板上，空腸彎曲菌敏感而腸道彎曲菌不敏感．
6.5.7 TTC（2，3，5——氯化三苯四氮吐）試驗：空腸彎曲菌在TTC培養基上裏陽性，而胎兒彎曲菌為陰性，陽性者為紫色菌苔並有光澤。
6.5.8硝酸鹽還原試驗：取培養物的濃菌懸液，在37℃ 置2h，加人試劑，觀察顏色反應，空腸彎曲菌星紅色的陽性反應。6.5.9彎曲菌的生化鑒別見表工。
6.6生物分型
6.6.1快速馬尿酸鈉水解試驗：將細菌接種在1％馬尿酸鈉0.4ml，37℃水浴2h，再加丙酮與丁酮溶液的3.5％茚三酮0.2ml，徐徐加入避免相混，放置10min觀察結果。深紫色為陽性，淡紫色或無色為陰性。
6.6.2快速硫化氫試驗，取一環細菌懸浮於快速硫化氫半固體瓊脂上三分之一段，37℃水浴2h，觀察結果，細菌團塊周圍變黑為陽性。
6.6.3 DNA酶水解試驗：細菌點種於DNA酶甲基綠瓊脂平板上，微需氧環境培養3d——5d，菌苔周圍出現無色透明環為陽性。
6.7血清分型空腸彎曲O因子分型應采用間接血凝法，H或K因子分型可用玻片凝集法。
6.8菌種保存空腸彎曲菌菌種應接種在改良Camp-BAP斜麵培養基上（棉塞不宜過緊），於42℃ 43℃ 需氧中培養48h後，置4℃ 箱微需氧內可保存10d～14d，需要時仍可轉種一次，長期保存用凍幹法。
6.9注意事項對空腸彎曲菌檢驗時，應嚴格執行無菌操作．防止自身感染。
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