1、範圍
本標準規定了食品中常見的常見產毒黴菌的鑒定方法。
本標準適用於曲黴屬、青黴屬、鐮刀菌屬及其他菌屬的產毒黴菌鑒定。
2、規範性引用文件
下列文件中的條款通過本標準的引用而成為本標準的條款。凡是注日期的引用文件,其隨後所有的修改單〔不包括勘誤的內容)或修訂版均不適用於本標準,然而,鼓勵根據本標準達成協議的各方研究是否可使用這些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件,其最新版本適用於本標準。GB/T4789.28一20此食品衛生微生物學檢驗染色法、培養基和試劑
3、設備和材料
3.1冰箱:O℃~4℃。
3.2恒溫培養箱:25℃—28℃
3.3顯微鏡:IOX—100X。
3.4目鏡測微計。
3.5物鏡測微計,
3.6無菌接種罩。
3.7放大鏡。
3.8滴瓶
3.9接種勾針。
3.10分離針。
3.11載玻片。
3.12蓋玻片:18mm*18mm。
3.13滅菌刀子。
4、培養基和試劑
4.1乳酸—苯酚液:按GB/T4789.28一2003中3.24規定。
4.2察氏培養基:按GB/T4789.28一2003中4.77規定。
4.3馬鈴薯—葡萄糖瓊脂培養基:按GB/T4789.28一2003中4.78規定。
4.4馬鈴薯瓊脂培養基:按GB/T4789.28一2003中4.79規定。
4.5玉米粉瓊脂培養基:按GB/T4789.28一2003中4.81規定。
5、操作步驟
5.1菌落的觀察:為了培養完整的巨大菌落以供觀察記錄,可將純培養物點植於平板上。方法是:將平板倒轉,向上接種一點或三點.每菌接種兩個平板,倒置於25℃~28℃溫箱中進行培養。當剛長出小菌落時,取出一個平皿,以無菌操作,用小刀將菌落連同培養基切下1cm*2cm的小塊,置菌落一側,繼續培養,於5d—14d進行觀察。此法代替小培養法,可直接觀察子實體著生狀態。
5.2斜麵觀察:將黴菌純培養物劃線接種(曲黴、青黴)或點種〔鏈刀菌或其他菌)於斜麵,培養5d—14d,觀察菌落形態,同時還可以將菌種管置顯微鏡下用低倍鏡直接觀察孢子的形態和排列。
5.3製片:取載玻片加乳酸一苯酚液一滴,用接種針鉤取一小塊黴菌培養物,置乳酸一苯酚液中,用兩支分離針將培養物撕開成小塊,切忌塗抹,以免破壞黴菌結構;然後加蓋玻片,如有氣泡.可在酒精燈上加熱排除。製片時最好是在接種罩內操作,以防孢子飛揚。5.4鏡檢:觀察黴菌的菌絲和孢子的形態和特征、孢子的排列等,並做詳細記錄。5.5報告:根據菌落形態及鏡檢結果,參照以下各種黴菌的形態描述及檢索表,確定菌種名稱.
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