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中林美荷楊的組織培養



錄入時間:2009-6-16 14:39:53 來源:百度

1 植物名稱 中林美荷楊(Populus sp.)。
2 材料類別 當年生嫩枝葉柄
3 培養條件分化培養基:(1)MS+6-BA0.4mg·L-1(單位下同);(2)MS+6-BA0.4+NAA0.05。壯苗培養基:(3)MS+6- BA0.2+NAA0.1+GA0.2。生根培養基:(4)1/2MS+IBA0.2;(5)1/2MS+IAA1.0。以上除生根培養基外均加入蔗糖 30%,生根培養基加蔗糖1.5%和瓊脂0.7%,PH5.8~26.0。培養溫度26~28℃,光照時間16h·d-1,光照度1600lx。 4 生長與分化情況
    4.1 無菌材料的獲得從當年生嫩枝上取新生葉柄(不含葉片),置燒杯中用自來水衝洗30min,在超淨工作台中先用70%酒精表麵消毒30s,無菌水衝洗遍,再用0.1%升汞攪動處理5min,無菌水衝洗3-5遍。將葉柄切成0.5~1.0cm的小段接種於分化培養基(1)、(2)中。
    4.2 叢生芽的誘導及增殖外植體接種約15d後,葉柄切口兩端開始膨大,並有綠色芽點產生,繼續在該培養基上生長約15d後能看見0.5cm高的不定芽叢。一般 30d繼代1次,增殖倍數6~8。用1個單芽繼續在培養基(1)、(2)上分化,20d繼代1次,其增芽倍數在10以上,有所增加。
    4.3 芽的伸長及根的生長 將產生的叢芽從外植體上切下,分割成單芽接入培養基(3)中壯苗,並增加其木質化程度,待形成較健壯小植株後移於培養基(4)、(5)中生根。15d後生根率達90%以上,每株約有4~6根。
    4.4 試管苗移栽 再生苗先在室溫、自然光的環境下鍛煉10d後,打開瓶塞鍛煉3d,小心取出,洗淨根上培養基,移於沙土和蛭石(3:1)的混合基質中,保證濕度,控製溫度,其成活率在70%以上。
    5 意義與進展中林美荷楊是楊柳科楊屬植物,是近年來中國林業科學院以北美“黑楊”與歐洲“荷蘭楊”雜交培育成功的一種新的速生楊優良樹種。其適應性強、雄性、不飛絮,生長速度快、抗寒、抗旱、耐瘠薄和抗病蟲害(如抗光肩星天牛)等。當年生的幼齡楊木材清白、纖維長(1.009~1.190mm),加工性能好,是用作造紙、綠化和飼料的好材料,具有廣泛的應用前景。但此品種的抗鹽堿性較差,建立高效組培再生係統,對用中林美荷楊為轉化受體,進行抗鹽基因的遺傳轉化,提供了技術基礎。中林美荷楊組培尚未見報道。

 

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