摘要：以冬青苦丁茶樹的幼嫩枝梢為材料進行組織培養，結果表明：外植體在MT 十BA lmg/L＋2 , 4 一D 0.05mg/L 培養基培養，腋芽萌發最快，萌發率最高；隨著外植體木質化程度的增加，褐變率降低，腋芽萌動時間縮短，萌動率提高；5 、8 、10 月份取材的外植體，萌動率5 月＞8 月＞10月，腋芽萌動時間則相反；MT + BA 0.5 mg / L 十NAA 0.2mg/L 培養基能使試管小苗莖段快速增殖；試管苗在1/2MT + NAA 0.2 mg / L + IBA 0.2 mg / L 培養基上短時間培養後，蜓石上扡插發根，較容易移栽成活。
關鍵詞：冬青苦丁茶樹；組織培養；增殖；移栽
冬青苦丁茶為冬青科冬青屬常綠闊葉喬木，其老葉、嫩芽茶藥兩用已形成產業，有“綠色黃金”、“搖錢樹”之稱。冬青苦丁茶主要分布於廣西、海南島、浙江等南方省份, 是我國稀珍樹種。因其樹姿優美，可作大型盆景供觀賞之用，也用於綠化。由於冬青苦丁茶自然資源很少，種子自然萌發率低於0.5 % ，目前冬青苦丁茶樹主要以扡插繁殖種苗，因此采用人工雜交和生物技術育種是當務之急。迄今有關苦丁冬青的組織培養研究很少，進展較慢。筆者以幼嫩枝梢為材料，探討了冬青苦丁植株再生的途徑，以期為進一步研究其生理、生化、遺傳育種、良種繁育、開發野生資源提供手段。
1 材料與方法
1.1 材料
以從廣西引進的冬青苦丁樹5 、8 、10 月份萌發生長的幼嫩枝梢為試驗材料。
1.2 方法
1.2.1 外植體選擇
材料采集後置於70 ％酒精中浸泡20s後，轉人加人少量吐溫的0.2 % Hgcl2 溶液中浸泡20 min ，在無菌條件下用無菌水衝洗4~6 次，切取長0.5 一1.0 cm 的頂芽或具腋芽的莖段作為外植體。以頂芽、具有第2 一3 個腋芽（由上向下，下同）的莖段、第4 一5 個腋芽莖段、第6 個腋芽莖段和具有駐芽的莖段分別作為外植體 I、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、 V。 試管苗具有 2～3個不完全葉的腋芽莖段、 2片真葉及腋芽的莖段、1 片真葉的頂芽莖段分別作為外植體M1 、M2 、M3 。
1.2.2 培養基及培養條件
以B5 、MS 、MT 和改良White 的大量元素、微量元素、維生素、氨基酸及蔗糖30g/ L 為基本培養基，0.8 ％瓊脂固化，pH5.7 - 5.8 。添加不同濃度的IBA 、NAA 、2 , 4 一D 和6 一BA ，共設15種培養基。
1.2.3 數據統計及介析方法
各處理重複3 次。培養30d 後，分別統計褐化率、萌芽率、成苗率。以外植體大部分變成深褐色或黑色者，腋芽鱗葉出現褐黑色的為褐化死亡；以腋芽膨大帶黃綠色的作為芽萌動的標準（冬青苦丁茶腋芽未萌動時，肉眼觀察僅有小突起）；芽萌動時間（d ）為在各處理的所有外植體中，有10 個外植體出現芽萌發時的天數。計算芽萌動率的外植體總數為接種的總外植體數減去褐化死亡的無菌外植體數。
褐化率（% ) ＝褐化的外植體數／接種的外植體總數x 100
芽萌動率（% ) = （腋芽己萌發的外植體數／外植體總數）x 100
小苗生根率（% ) =（生根小苗數／培養的小苗數）x100
小苗移栽成苗率（% ) = （成活小苗數／移栽小苗總數）x 100
上一篇：東方百合莖尖組培技術研究
下一篇：冬青苦丁茶樹組織培養的研究二
