一、液體基礎培養基
1.蛋白腖水
[用途]
用於細菌靛基質試驗;以及一般細菌培養和傳代。
[配法]
蛋白腖(或胰蛋白腖)10g,氯化鈉 5g,蒸餾水1L。
將上述成分溶於水中,校正pH 至7.2,分裝試管,每管2~3ml,置121℃滅菌15min備用。
[質量控製]
大腸埃希菌生長良好,靛基質陽性;傷寒沙門菌生長良好,靛基質陰性。
2.營養肉湯
[用途]
一般細菌的增菌培養,加入1%的瓊脂粉亦可作營養瓊脂。
[配法]
蛋白腖10g,牛肉膏3g,氯化鈉5g,蒸餾水1L。
將上述成分稱量混合溶解於水中,校正pH至7.4,按用途不同分裝於燒瓶或試管內。經121℃滅菌15min,作無菌試驗後冷藏備用。
[質量控製]
金黃色葡萄球菌、傷寒沙門菌、化膿性鏈球菌生長良好。
[保存]
置冰箱3周內用完。
3.牛肉浸液培養基
[用途]
細菌培養最基礎的培養基,除用於一般細菌的培養外,又可以作營養瓊脂及其它培養基的基礎。
[配法]
新鮮除脂牛肉 500g,氯化鈉5g
蛋白腖10g,蒸餾水1L。
先將牛肉清洗,除脂肪、肌腱,並切塊絞碎。稱取500g置容器加入蒸餾水1L,攪勻後置冰箱過夜,次日煮沸加熱30min,並用玻棒不時攪拌用絨布或麻布進行粗過濾,再用脫脂棉過濾即成。在過濾中加入蛋白腖10g、氯化鈉5g溶解後,用氫氧化鈉溶液校正pH至7.6~7.8,並加熱煮沸10min,補充蒸餾水至1L,最後用濾紙過濾,呈清晰透明、淡黃色液體,經121℃15min滅菌備用。
[用法]
根據用途不同可以製成營養肉湯,以此為基礎製成其它培養基。如製作固體培養基,加入瓊脂15 ~20g/L即可。
[質量控製]
金黃色葡萄球菌、大腸埃希菌、傷寒沙門菌、痢疾誌賀菌等均生長良好。
[保存]
置4℃冰箱內可以使用較長時間。
注:商品牛肉浸膏粉,一般使用量為3~5g/L。
二、固體基礎培養基
1.營養瓊脂
[用途]
一般細菌和菌株的純化及傳種。 [配法]
蛋白腖10g,牛肉膏3g,氯化鈉5g,瓊脂粉(優質)12g,蒸餾水1L。
將上述成分(除瓊脂外)溶於水中,校正pH 7.2~7.4後加入瓊脂,煮沸溶解,根據用途不同進行分裝,經121℃滅菌15min,傾注平板或製成斜麵,冷藏備用。
[質量控製]
金黃色葡萄球菌菌落呈淺黃色; 痢疾誌賀菌菌落無色;銅綠假單胞菌 菌落無色或淺綠色。
[保存]
置4℃冰箱保存,2周內用完。
2.血瓊脂培養基
[用途]
一般病原菌的分離培養和溶血性鑒別及保存菌種。
[配法]
pH 7.4~7.6牛肉浸液瓊脂 100ml,脫纖維羊血(或兔血) 5~10ml。
將血瓊脂基礎經121℃滅菌15min,待冷卻至50℃左右以無菌手續加入羊血,搖勻後立即傾注滅菌平皿內,待凝固後,經無菌實驗冷藏備用。
[質量控製]
化膿性鏈球菌ATCC 19615生長良好,β-溶血;肺炎鏈球菌ATCC 6303生長良好,α-溶血;表皮葡萄球菌ATCC 12228 生長良好,不溶血。
[保存]
置4℃冰箱,1周內用完。
3.巧克力瓊脂培養基
[用途]
主要用於嗜血杆菌的分離培養,亦可用於奈瑟菌的增殖培養。
[配法]
鮮牛肉浸出液1L, 蛋白腖10g,
氯化鈉5g,瓊脂粉12g,無菌脫纖維
羊血或兔血100ml。
將上述成分(除兔血外)加熱溶解,調pH至7.2,置121℃15min高壓滅菌,待冷至約85℃,以無菌方式加入兔血,搖勻後置85℃水浴中,維持該溫度10min,使之成巧克力色。取出置室溫冷至約50℃,傾注平板或製成斜麵備用。
[質量控製]
流感嗜血杆菌ATCC 10211、肺炎鏈球菌ATCC 6305生長良好,菌落典型。
[保存]
置4℃冰箱,1周內用完。
4.胱氨酸胰化酪蛋白瓊脂
[用途]
常用於測定腦膜炎奈瑟菌和淋病奈瑟菌以及營養要求較高細菌的糖發酵試驗。
[配法]
胱氨酸0.5g, 胰化酪蛋白20g,氯化鈉5g,亞硫酸鈉0.3g,瓊脂3.5g,酚紅0.0175g,蒸餾水1L。
將上述成分(酚紅除外)混合溶解,調pH至7.2,加入酚紅指示劑。分裝試管,115℃滅菌15min。
[用法]
用於測定糖發酵時,按需要加入各種糖溶液,將待檢標本直接種於培養基管內,置35℃孵箱,18~24h觀察結果。培養基由紅色變為黃色為陽性,不變色為陰性。
此資料僅供參考。
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