兩相溶劑間分配係數法-病毒提純方法
錄入時間:2009-6-26 9:28:53
來源:青島betway必威西汉姆联
該法主要原理就是高分子物質以溶質形式存在於兩相溶劑中,根據其分配係數的不同而選擇性地分配於其中的一方,從而達到純化的目的。所采用的溶劑主要有:葡聚糖硫酸鹽(Dextran]Sulphate,DS)和聚乙二醇(PEG)或甲基纖維素(MC)和聚乙烯醇(PVA),形成DsPEG係、DsPVA係和DsMC係。利用病毒在有機溶劑中的分配原理,在適當的溶劑係統和葡聚糖層之間進行多次反複轉換,不僅能夠濃縮病毒,而且還可以純化病毒。 通常是將兩相溶劑如DsPEG以適當的重量百分比混合,然後加入病毒液,數次激烈振蕩混合,置於4℃]24~36小時,即可分離為兩層,病毒將特異地分布於其中一方(如Ds層]中)。適當改變溶劑的混合比例時,分配於Ds層中的病毒可由Ds層轉入PEG中,而得以濃縮]。若調節適當,一步就可濃縮100倍,兩步濃縮就可以達到10]000倍。非病毒物質通常以]不同的方式進行分配,從而達到濃縮純化的目的。Nammar(1991年)應用DsPVA係純化了反轉錄病毒。兩相溶劑間分配係數法簡單、溫和,並能使病毒得到較高的濃縮和純化。但是為了獲得高度純化的病毒,還需配合應用其它方法。
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