摘要：以金正日球根海棠的葉片為外植體進行組織培養的誘導，以Ms培養基為基本培養基，並附加不同濃度的細胞分裂素6 一BA 以及生長素NAA 或2 , 4 一D 進行組織培養和植株再生。經實驗篩選出最適合誘導愈傷組織的培養基是MS + 6 一BA1.0一2.0 + NAAO.1 一0.5 ；脫分化的最佳激素組合是培養基MS + 6-BA1.0 + NAAO.5 。
關鍵詞：球根海棠；組織培養；誘導
球根海棠以其花大、色豔而被譽為觀花類秋海棠之王，金正日是從球根海棠中選育出的紅色大花品種。球根海棠是多年生球根花卉，品種繁多，碩大鮮豔的花朵形似茶花或牡丹，美麗誘人，觀賞價值極高。球根海棠多年生草本，地下具有肉質扁圓形的塊莖，為園藝雜交品種，株高30 ~60 cm 。莖直立，肉質，綠色或暗紅色，被毛。單葉互生，葉片斜卵形，先端銳尖，葉緣有齒牙。花頂生，重瓣，紫紅色、黃色或粉色等，其花大如茶花，直徑可達20 cm ，花期9 月至翌年5 月。喜溫暖濕潤的生活環境，夏季涼爽的氣候，在富含腐殖質，排水良好的微酸沙質壤土上生長較好。球根海棠兼有月季、牡丹、茶花等名貴花種的色、香、姿、韻，是珍貴的觀賞花卉，經濟價值較高。球根海棠的傳統繁殖方法是種子繁殖、扡插、嫁接、分株等方法，繁殖係數低、苗木質量差、繁殖周期長、品種推廣慢，且受季節和自然發育的限製，嚴重阻礙了花卉業在我國的迅速發展。近年來，植物組織培養應用於植物的離體快速繁殖，是目前應用最多、最廣泛和最有成效的一種技術。利用組織培養便可以提高苗木質量，使品種純化、優化，加快繁殖速度，提高經濟效益。組織培養是國內外最先進的無性繁殖方法，可以在短期內進行大量繁殖，迅速形成生產規模，以滿足不斷增長的廣大鮮花消費者及市場的需求。
1 材料與方法
1.1 實驗材料
供試材料為球根海棠金正日的幼嫩葉片。
1.2 實驗方法
1.2.1 外植體的獲得與滅菌金正日的組織培養以嫩葉作為外植體。在取材前15d 左右，把母株置於溫室內，要防止往葉片上噴水。在接種前選擇健壯無病的葉片剪下，放入廣口瓶，加少量洗衣粉，然後用自來水衝洗20 一60 min 。在無菌室內用73 ％的乙醇滅菌3 一5s ，用無菌水衝洗一次，接著用0.1 ％的氯化汞溶液浸泡5 一7min （浸泡過程要輕輕搖幾次），再用無菌水衝洗4 一6 次，將滅過菌的葉片放在無菌紙上，剪成1cm2左右的小塊。接種到預製的已滅過菌的MS 培養基上，每個試管隻接種一個外植體。
1.2.2 培養基及培養條件基本培養基為MS ，蔗糖3%，瓊脂 0.7 5%， p H 5.8 。並添加有不同種類和濃度的植物生長調節劑。培養溫度為( 2 5 ±1 ) ℃， 光照強度
1 5 0 0 ~20 0 0l x ， 每 日光照 1 2h。
1.3 球根海棠愈傷組織誘導和分化的研究
1.3.1 激素組合對愈傷組織形成的影響將配製好的 8種初始培養基分裝在三角瓶中， 再將經過滅菌後接種在基本培養基中培養 1 0 d ， 無汙染的葉片隨機分成 8組， 每組 3 O塊， 分別轉接於 8種含有不同激素組合的初始培養基中進行初代培養，培養室的溫度控製在2 0 ~2 2 ℃， 光照強度在 1 5 0 0 l x ， 每天光照 1 2 h 。每天觀察球根海棠葉片的變化， 觀察、 記錄不同培養基中愈傷組織的發生時間、生長速度、 發生數量及產生的愈傷組織的顏色等， 2 0d後分別統計在不同培養基中愈傷組織發生的塊數。
1.3.2 不同培養基的不定芽分化比較 將配製好的 8種初始培養基分裝在三角瓶中， 再將在基本培養基中培養 1 0d後無汙染的葉片隨機分組， 每組 3 O塊， 分別轉接於 8 種含有不同激素組合的初始培養基中進行初代培養， 培養室的溫度控製在 20 ～2 2 ℃， 光照強度在 15 0 0 l x ， 每天光照 1 2h ， 3 0d後轉接一次， 直到 8種培養基中都有不定芽的分化， 觀察、 記錄不同基因型在不同激素組合下愈傷組織的增殖速度和數量及再分化開始時間、 分化的速度、芽點的顏色、 密集程度等， 統計在不同培養基中再生植株的多少。觀察愈傷組織與不定芽發生的關係。
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