合果芋組織培養快繁技術研究一
錄入時間:2009-6-26 9:54:04
來源：青島betway必威西汉姆联
摘要：以合果芋幼嫩側芽為外植體，研究了不同激素濃度對合果芋組織培養的影響。結果表明：用0.1 ％的氯化汞溶液＋3 滴Tween20 對外植體處理35 min ，滅菌效成功率達75 % ；較好的誘導培養基為MS 十BA 5.0mg/L 十IAA 0.2mg/L ，最佳的增殖培養基為BA 2.0mg/L 十NAA 0.1mg/L ，最好的生根培養基為MS 十NAA 0.3mg/L + IAA 0.2mg/L ；生根瓶苗置於室外自然光線下練苗7d 後，移栽到珍珠岩：腐殖土：壤土＝1 ： 1 ： l 的基質中，成活率可達94 ％以上。
關鍵詞：合果芋；組織培養；快繁；培養基
合果芋，又名箭葉芋，為天南星科多年生常綠攀緣草本植物，原產於中南美洲熱帶地區，全世界廣泛栽培，我國南方各省種植十分普遍。它除了廣泛應用於室內盆栽觀賞外，還可設立成綠色支柱造型，更多用於室外半陰處作地被覆蓋，是一個極具發展潛力的觀葉植物。
合果芋的常規繁殖方法為扡插或分株，分株繁殖通常在秋季至冬季。但繁殖係數較低，質量較差，整齊度低，成本較高，而且受季節的影響，種苗滿足不了市場的需求。為此，探索一條規模化快繁技術十分必要，有關合果芋的組織培養研究國內已有報道，但係統研究較少。試驗以合果芋的側芽為外植體，研究不同濃度BA 、NAA 和IAA 對不定芽誘導和生根的影響，探討適合合果芋離體快繁的最佳激素組合，並建立組培快繁的技術體係，為合果芋新品種選育和優質種苗工廠化生產提供技術支持與儲備。
1 材料和方法
1.1 供試材料
取雲南省農科院花卉所內la 生無病蟲害優選單株的幼嫩側芽60 個作為外植體，品種為‘金童子’。
1.2 試驗方法
1.2.1 外植體的處理與消毒將采回的外植體去除老葉部分，采集的側芽由生物學基部至上約1cm 處以手術刀切斷，此段即為需接種的外植體部分。將外植體用洗衣粉水清洗2 ~3 次，洗時用手輕輕揉搓，洗後以清水衝淨。用75 ％的酒精溶液外植體表麵消毒1 min ，用無菌水衝洗1 遍。將外植體平均分為3 個處理，每個處理20 個芽，用0.1 ％的氯化汞溶液＋3 滴Tween20 對外植體分別按35 、30 、25 min 的時間段進行滅菌後，以無菌水衝洗2 次人超淨台。然後用0.2 ％氯化鈉溶液2ml＋3 滴Tween20 分別對各外植體進行滅菌處理25 min ，後用無菌水衝洗2 次。將處理後的外植體分別接人MS 十BA 1 + IAA 0.2 普通草本花卉常用的誘導培養基中，每組20 瓶，為防止滅菌後的交叉汙染，每瓶接人1 芽，7d 後觀察結果，而後轉人誘導培養基中。
1.2.2 誘導和增殖培養
不同誘導培養基的處理：將滅菌成功後的外植體平均分為3 組，分別接人加有① BA 10 + IAA 0.2 ，② BA5 十IAA 0.2 ，③ BAI + IAA 0.2 的MS 誘導培養基中，方法參照熊麗等編寫的專著圖。每組10 瓶，每瓶為1 次重複。每瓶接人1 芽，封口膜采用不透氣膜。以培養基失水時間來決定，30d 為1 個培養周期，第2 個周期取出切分後，繼續用上述3 種培養基分別進行誘導，3 個周期後觀察誘導出的不定芽總數及其生長情況，篩選合適的誘導培養基主成分，並在後續的培養中加以應用。不同增殖培養基的處理：配製MS 為基本培養基的3 組不同激素濃度：① BA5 十NAA 0.1 、② BAZ + NAA 0.1 、③ BAI + NAA 0.1 的增殖培養基，每組10 瓶，將誘導出的叢生芽在超淨工作台上切分為0.5 cm2 左右的小塊，並將切分後的小塊分別接人以上3 組培養基中，每瓶6 塊，每瓶為1 次重複，l 個周期後觀察增殖培養後產生不定芽的總數和和平均高度，計算繁殖係數，篩選最佳的增殖培養基激素濃度組合。1.2.3 生根培養增殖培養2 個周期後，從增殖出的不定芽中切出長約1.ocln 左右單株粗壯幼苗分別接入不同激素濃度：① NAA 0.1 、② NAA 0.5 、③ NAA 0.1 + IAAo.1 、④ NAA 0.3 十IAAO.2 的生根培養基中，每組10 瓶，每瓶10 株，每瓶為1 次重複，1 個周期後觀察生根培養效果，統計總生根苗數、開始生根的天數、生根量和生根率，篩選最佳的生根培養基激素濃度組合。
1.2.4 過渡移栽
當生根培養基數達到一定數量時，選取已長出1cm 根毛的生根苗20 瓶，要求每瓶生根苗數不低於20 株。將它們置於室外光線下閉瓶培養，7d 後取生根苗150 株，洗掉小苗根部的培養基，去掉基部發黃葉片，栽人滅過菌的基質中（設計3 組基質：① 淨腐殖土；② 腐殖土十珍珠岩3 : 1 ；③ 淨珍珠岩），澆透水後以薄膜覆蓋，濕度控製在90 ％以上，每周澆1 次1 / 2MS營養液。進行室外過渡試驗，每組基質過渡苗50 株，單株重複，采用相同的水肥管理方法，30d 後觀察統計各處理成活率、平均株高和根長，以篩選最佳的過渡方式和基質。
1.3 培養條件
室內培養條件光照時間10 一12h ，光照強度2000lx ，培養溫度20~ 25℃ ，培養基含糖30 % ，瓊脂7g/L , pH 5.8 。室外培養條件為光照時間12h ，光照強度4 000 一10 000 lx ，溫度12 一25℃。
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