〖BT4〗1.實驗動物根據欲分離病毒的種類，選擇適當的實驗動物和接種途徑。動物病毒 學實踐中，還常應用本動物進行實驗感染試驗，例如應用健康馬駒作馬傳貧病毒的接種試驗 ，應用健康豬、雞分別作豬瘟、新城疫等的接種試驗等等。本書第三篇“病毒學各論”中 將介紹各該病毒 的動物試驗的詳細方法。
〖BT4〗2.雞胚目前常用雞胚分離的病毒有正粘病 毒、副粘病毒、痘病毒、腦炎病毒及引起禽類疫病的其它許多病毒等。現列表說明幾種主要 動物病毒的接種途徑、敏感性和病變特征(表14-1)，並請參閱表8-1。〖HT5”H〗〖JZ 〗表14-1〓動物病毒的雞胚接種途徑和敏感性〖HT6SS〗〖BG(〗〖BHDFG4，WK11,K22，K9 ，K9W〗病毒種類〖〗〖ZB(〗〖BHDWG2，WK22〗 接〓種〓途〓徑〖BHDG2，K4,K6,K4,K4,K4 〗卵黃囊〖〗絨毛尿囊膜〖〗尿囊腔〖 〗羊膜腔〖〗腦內〖ZB)〗〖〗病變特征〖〗備注〖BHDG2，WK11ZQ，K4,K6,K4。3，K9。2Z QW〗狂犬病病毒〖〗〖〗〖〗〖〗〖〗〖〗雞胚死亡〖〗〖BHDW〗乙型腦炎病毒〖〗 〖〗〖〗〖〗〖〗〖〗雞胚死亡〖〗〖BH〗馬腦炎病毒〖〗〖〗〖〗〖〗〖 〗〖〗雞胚死亡〖BH〗流感病毒〖〗〖〗〖〗〖〗〖〗〖〗雞胚死亡〖〗出現血凝素 〖BH〗新城疫病毒〖〗〖〗〖〗〖〗〖〗〖〗雞胚死亡〖〗同上〖BHG2*2〗〖HJ*8〗淋 巴細胞性脈絡叢腦膜炎病毒〖〗〖〗〖〗〖〗〖〗〖〗〖〗輕度水腫〖HJ*2〗〖〗 〖BH〗痘〓病〓毒〖〗〖〗〖〗〖〗〖〗〖〗痘〓〓〓斑〖〗〖BH〗藍舌病病毒〖〗〖 〗〖〗〖〗〖〗〖〗白斑或雞胚死亡〖〗靜脈內更敏感〖BH〗傳染性支氣管炎病毒〖〗 〖〗〖〗〖〗〖〗〖〗雞胚卷縮死亡〖〗〖BH〗傳染性法氏囊炎病毒〖〗〖〗〖〗 〖〗〖〗〖〗雞胚死亡 〖〗〖BHG4*2〗雞白血病病毒〖〗〖〗〖〗〖〗〖〗〖〗腫瘤性痘斑 〖〗卵黃囊和靜脈接種，出雛後兩周內腫瘤發生率很高〖BHG2〗鵝細小病毒〖〗〖〗〖 〗〖〗 〖〗〖〗胚胎死亡〖〗〖BG)F〗〓〓注：〓、、表示遞增的敏感性，以下說明不 易分離獲得病毒。
〖HT5SS〗〖BT4〗3.組織培養細胞選擇生長旺盛的敏感細胞備用。傾棄或吸去營養液並以Hanks液 或Earle氏液洗滌1～2次，加入不同稀釋度的接種物(病毒液或待檢病料懸液)， 每個稀釋度 最少用2～3個細胞培養瓶。接入量以能使病毒液蓋滿細胞層為度。搖勻後置37℃溫箱內感作 30～60分鍾，使病毒充分吸附於細胞上。應用不同稀釋度接種物的目的，是避免因病毒接 入量太大而引起自家幹擾現象，同時也是為了減少接種物中的毒性物質造成細胞損傷。吸 附30～60分鍾後加入新的維持液。維持液中不應含有相應的抗病毒抗體，因此不得加入對 該病毒 敏感的動物的血清，因其可能因感染或疫苗接種而在血清中含有特異性抗體。例如分離豬瘟 病毒和新城疫病毒時，不能應用豬和雞的血清；分離口蹄疫病毒時不得應用牛、豬、 羊的血清等等。胎牛或未吮初乳的新生犢牛血清中通常不含特異性抗體，因為母體抗體不 能通過胎盤進入胎牛體內。但也必須指出，胎內病毒感染可能引起胎兒產生特異性抗體—— IgM。一般 而言，維持液中的血清含量應盡可能減少，甚至完全不用。如果接種物的毒性太大，例如 糞便懸液，則可使其吸附細胞30～60分鍾後，將其吸出，再用洗液輕輕洗滌1次細胞，隨 後加入維持液。這樣，病毒已經充分吸附在細胞上，而接種物對細胞的毒性則因及時換入 維持液而降低。某些病毒，例如腺病毒和馬傳貧病毒等，可將接種物直接加至維持液中 ，不必預先吸附。細小病毒在宿主細胞進行有絲分裂時增殖，故在分離和培養這類病毒時 ，強調早期接種，即在細胞培養物尚未形成單層時就接種病毒，甚至進行同步培養。所謂同 步培養，就是將病毒接種於經胰酶分散的新鮮細胞懸液中，隨後一起分裝培養。於溫度較 高的環境中，為保證病毒活力，特別是對抵抗力弱的病毒，操作過程中應將接種物(病 毒懸液)置於冰浴中。
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