病毒RNA的穩定性 用等體積苯酚處理病毒粒子,離心沉澱後,上層為水相,下層為酚相。病毒蛋白位於兩相分界處,正鏈ssRNA溶於水相中,水相中的RNA仍具有感染活性,經RNA酶(＜001μg/ml)處理後感染活性消失。在完整病毒粒子中,病毒RNA相當穩定,即使將RNA酶濃度提高100萬倍亦不能水解病毒RNA。小RNA病毒基因組中所有基因對於病毒的複製都是重要的。在疫苗製備和研究工作中,不僅要防止野生病毒的汙染,還應注意病毒RNA的感染活性。
5.病毒的pH穩定性 腸道病毒、心病毒和甲型肝炎病毒對酸性條件具有很高的穩定性,在pH3或更低的pH下仍能存活。鼻病毒、口蹄疫病毒在pH6以下即失活。對pH穩定性的差異可能是由於病毒的感染途徑不同造成的,例如腸道病毒必需經口腔,通過胃的酸性環境才能到達腸道;而對酸性敏感的鼻病毒和口蹄疫病毒往往在鼻部和食管上部引起感染,因此無需對酸的穩定性。從生物化學角度分析,病毒對pH的穩定性與殼粒蛋白結構有關。在過高或過低的pH條件下,可能引起蛋白質二、三、四級結構的改變,不過這種變化對於蛋白單體來講往往是可逆的。親和層析和離子交換層析提純病毒蛋白時,需要改變洗脫液的pH值,以免影響蛋白質的活性。根據我們的經驗,口蹄疫病毒在pH5條件下處理2小時,即失去感染活性。一般認為這是由於殼粒蛋白構象改變後,RNA酶進入病毒粒子並水解病毒RNA的結果。這種現象與高pH引起的病毒殼粒蛋白由N型向H型的不可逆變化不同。
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