在將外植體進行切分的試驗中,從表2 可以看出,將外植莖尖切分為二等分的誘芽率最高,切分為四等分的因為切口褐變影響成活而致使誘芽率最低。
3.2 繼代培養
從表3 可以看出,細胞分裂素以添加6-BA 為好,繁殖率遠高於KT ; 6-BA 為6 mg / L 的組合雖然繁殖倍數最高,但小芽和無效芽較多,芽眼膨大,而且產生較多愈傷組織;而6-BA 為4 mg / L 的組合表現最好,不但有較高的繁殖倍數,而且不定芽生長粗壯,基部愈傷組織很少,不會防礙芽的生長。隨著培養代數的增加,6-BA 的濃度要適當調低,一般以添加3mg / L 為好。
3.3 生根培養
將不定芽切割接種於1 / 2 MS + NAA 0.5 mg / L + AC 1 mg / L 的培養基上進行生根培養,4 一6d 後開始長根,培養約3 周即可長成具有兩片展開葉、2 ~ 3 條根的完整小苗。煉苗2 ? 3d 後便可移栽。為了增加育苗量,節省成本,可以采用袋培。
3.4 小苗移栽
試驗表明,組培小苗移栽成活率94%。根長3 ~
假植苗有變異,變異類型有畸形和花葉兩種,多數變異可修複,變異苗在苗期容易識別,可在育苗期檢查除去。大田種植未發現變異株。
4 討論
雖然較高的細胞分裂素水平(6-BA )能獲得較高的增殖率,但產生的變異株增加,因此生產上要根據叢芽的生長狀況適當調整6-BA 的水平,當繁殖倍數較高時,可以適當調低6-BA 的用量。我們在生產過程中,6-BA 一般采用3 mg / L 。在起始培養基中添加AD 能促進葉鞘的抽生,進而產生不定芽,培養基中沒有添加AD 的情況可以通過將莖尖切分為二來破壞其頂端優勢,促進不定芽的分化。
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