禽雙RNA病毒屬（一）

   傳染性法氏囊病病毒（Infectious bursal disease virus）〖BT)〗[HT5K]同義名：傳染性法氏囊炎病毒，蓋姆波羅病[ZW(]蓋姆波羅（Gumboro）是1957 年最早發現傳染性法氏囊病的一個美國地名。[ZW)]病毒，雞腎病變病毒。〖HT5SS〗傳染性法氏囊病（IBD）是雞的急性、高度接觸傳染性、殺淋巴細胞性疾病，主要發生於3～ 8周齡的幼雞，但也曾見於3月齡以上的雞。病雞精神沉鬱，羽毛逆立，下痢，震顫，共濟失 調。發病率可達100%，死亡率為5～15%，有時高達20%以上，並發或繼發感染所致的死亡率 更高。剖檢見法氏囊嚴重水腫，並有壞死灶，內含淡黃色膠凍樣滲出物，粘膜麵上有時有出 血點或出血斑。病後期的法氏囊可能萎縮。雞屍可能並不消瘦，但胸肌、腿肌上常有出血斑 的存在。腎小管和輸尿管內有尿酸鹽沉積，心包和肝髒表麵也常出現尿酸鹽。2周齡以下的 雛雞發生感染時，大多呈亞臨床感染。 由於本病侵害體液免疫中樞器官——法氏囊，導致免疫抑製，從而降低機體對其它傳染病的 免疫反應性。雞早期感染傳染性法氏囊病毒後，對其它病毒和細菌的易感性增高，也能影響 免疫接種效果，據報道，能降低新城疫疫苗免疫效果40%以上，降低馬立克氏病疫苗免疫效 果20%以上。本病遍布於全球養禽地區，在工業化養雞業發達的國家尤為嚴重，隻有新西蘭例外，目前無 IBDV感染的雞群。我國於1979年先後在北京、廣州、上海等地發現本病，現已傳遍全國各地 ，給養雞業造成了很大的經濟損失。〖JZ〗圖20-1位置[HT5”H][JZ]圖20-1〓傳染性法氏囊病病毒[CD2]結晶狀排列， N為細胞核[JY,4][CD2]自周蛟等[HT][BT4]1  形態本病毒無囊膜、呈廿麵體立體對稱。三角剖分數T=13。有單層衣殼，病毒粒子直徑 約60nm，除完整病毒粒子外， 還常見有空衣殼。[BT4]2  理化學特性目前公認IBDV有4種結構多肽: Vp1、Vp2、Vp3、Vp4，分子量分別為90kDa、41kDa 、32kDa和28kDa。其中Vp2和Vp3是病毒的主要結構蛋白，在血清Ⅰ型病毒中分別占51% 和40%（Dobos等，1979），而Vp1和Vp4分別占3%和6%，是病毒的次要蛋白質。除了上述 蛋白質之外，也觀察到附加體蛋白質Vpx，被認為是Vp2的前體。IBDV是雙RNA病毒科中 最先測定核苷酸序列的病毒，基因組的兩個節段中A片段3 300～3 400bp，主要包括一個大 的ORF，編碼分子量110kDa的多聚蛋白Vp2Vp4Vp3；B片段長2 800～2 900bp，編 碼Vp1。完整病毒粒子在氯化銫中浮密度為131～134g/cm3。病毒非常穩定，對乙醚和氯仿不 敏感，高度抗酸（pH2）。56℃ 5小時或60℃ 30分鍾仍有活力。pH12或70℃ 30分鍾條件下 病毒死亡，05%氯化銨作用10分鍾能殺死病毒。

3.抗原性已知IBDV有2個血清型，可用病毒中和試驗區別。Ⅰ型病毒對雞有致病力，對火雞無致病力 ；Ⅱ型病毒對雞和火雞不致病或隻有很弱的致病力。兩個血清型病毒抗原的相關性小於10% ，因此交叉保護力很低，體內有血清Ⅱ型病毒的抗體仍然可以受到血清Ⅰ型病毒的感染。Le e和Lukert曾提出可能存在第Ⅲ個血清型，但目前尚無足夠的資料。應用 瓊擴、熒光抗體和ELISA試驗發現，IBDV帶有共同的群抗原。兩種多肽Vp2和Vp3都含有 決定群抗原的抗原決定簇，隻有Vp2具有型特異的抗原。經常發生變異的部位主要在Vp2 的可變區，該區域的變化構成了抗原漂移的主要原因。已知Ⅰ型至少有6個亞型，作中和試 驗時亞型之間僅有一定程度的交叉，可以通過交叉中和試驗和交叉攻毒試驗進行鑒定。近年來在接種標準株疫苗而免疫失敗的雞群中分離出IBDV超強毒（vvIBDV）或變異株（vari ant），鑒定出的強毒分離物可引起與炎症或水腫無關的法氏囊損害。這些抗原性和病原性 變異株的蔓延擴散，使得IBD的防製複雜化。

4.培養雞胚接種是培養傳染性法氏囊病病毒的最好手段。應選用無母源抗體的雞胚進行病毒分離。 5～7日齡雞胚作卵黃囊接種，9～11日齡的雞胚則作絨毛尿囊膜（CAM）或尿囊腔接種。實踐 證明絨毛尿囊膜接種途徑最為敏感。將含病毒材料接種絨毛尿囊膜，雞胚通常在感染後4～6 天死亡。感染雞胚發育阻滯，水腫和出血。腎充、出血，肝髒可能發生斑點狀壞死和出血斑 ，CAM通常沒有明顯損害。在早期的病毒傳代中，雞胚液中病毒含量非常低，而雞胚（包括 內髒）和CAM中有大量病毒。在接種後4～5天，一般每ｇ組織含毒量可達104～105EID 50，而尿囊液中含量很低。比較尿囊腔、卵黃囊和CAM三種接種途徑，發現經尿囊腔接 種的病毒複製量最低，所產生的病毒滴度比CAM途徑低15log10～20log10的雞胚半數感 染量（EID50），卵黃囊途徑介於兩者之間。通過CAM接種雞胚很容易分離和培養IBDV變異株，但通常不會致死雞胚。由IBDV變異株引起 的雞胚病變與標準株有差異，通常表現為肝髒壞死和脾腫大。在用新分離毒株接種時，雞胚 液中很少含有病毒，當在雞胚中連續多次傳代以後，雞胚液中的含毒量增多，但病毒同時逐 漸降低對雞的毒力。盡管IBDV的初次分離最好用雞胚接種，但該病毒可以適應細胞培養。大多數實驗室使用雞胚 成纖維細胞（CEF）增殖IBDV，適應於雞胚的IBDV可在CEF上增殖，並產生細胞病變。可利用 蝕斑測定或微量滴定技術進行細胞培養物適應毒的定量分析，比雞胚接種法更敏感。IBDV也 能在雞胚法氏囊細胞、腎細胞中增殖，產生細胞病變和形成蝕斑。對IBDV敏感的非雞源性細 胞包括火雞胚細胞、鴨胚細胞、兔腎細胞（RK13）、猴腎細胞（Vero）和幼素領猴腎細胞 （BGM70）等。Jackwood等（1987）比較了三個哺乳動物細胞係MA104，Vero和BGM70 對 於IBDV血清Ⅰ型和Ⅱ型及血清Ⅰ型變異株的幾個毒株的生長情況。病毒在三個細胞係內均能 生長，BGM70細胞的病變最為明顯。BGM70細胞培養的中和滴度可與雞胚成纖維細胞相比 。用雞胚源的細胞培養物分離和連續傳代野外分離的IBDV是困難的。應該考慮到，病毒在體外 係統中增殖，有產生缺陷粒子的可能性。