5 病原性本病毒的自然宿主為雞和火雞，其它禽類未見感染，雞是唯一自然感染發病的動物。所有品 係的雞均可發病。3～6周齡的仔雞最易感。年齡較大的雞具有一定抵抗力，小於3周齡的雛 雞感染後會產生嚴重的免疫抑製。潛伏期短，人工感染後2～3天出現臨床症狀。在易感雞群中，初發的法氏囊病 多呈急性型。通常於感染後第3天開始死亡，並於5～7天達最高峰，以後逐漸減 少。本病突出的表現為發病突然，發病率高，死亡集中發生於很短的幾天時間 內以及雞群的康複較為迅速。病死雞呈現脫水現象，股部和胸部肌肉經常有出 血，呈條狀或塊狀。腸粘膜與腺胃有出血，腎髒蒼白腫大。法氏囊是本病毒的 主要靶器官，變化最為明顯。感染初期法氏囊水腫、出血，表麵有膠腖狀黃色 滲出液，表麵的縱紋變得明顯，顏色由白變成乳白色，至第4天腫脹最大，約較 正常法氏囊大2～3倍，第5天開始恢複正常大小，以後逐漸萎縮，到第8日僅為正常大小的1/ 3。病理組織學變化主要局限於法氏囊、脾髒、胸腺、哈德氏腺和盲腸扁桃體的淋巴結內 ，以髓狀淋巴組織細胞壞死為特征。法氏囊受損最嚴重，感染後第1天就觀察 到法氏囊濾泡髓質區的淋巴細胞壞死、變性。IBD是高度接觸傳染性的，病毒持續存在於雞舍的環境中，可通過直接接觸從雞 傳於雞，或通過汙染病毒的各種媒介物如飼料、飲水、塵土、器具、墊料、人 員衣鞋、昆蟲機械等間接傳播，也可能通過種蛋垂直傳播。將病毒滴入易感雞 的眼內，也易引起感染。常規措施通常不能使病雞舍徹底消毒。病毒主要經消化道傳入，開始在腸道巨噬細胞和淋巴細胞內初步增殖，然後隨 血流移至肝髒和法氏囊，經口人工感染後22小時就能在法氏囊淋巴細胞中檢測 到病毒。定居在法氏囊組織後，病毒大量增殖並釋放到其它組織，產生第二次 病毒血症。在法氏囊病的早期，病毒存在於除腦以外的絕大多數組織和器官中 ，其中以法氏囊和脾髒的含毒量最高，其次為腎髒。實驗感染3～6周齡火雞，僅表現輕微的臨床症狀，但是法氏囊有病理組織學變 化，並能分離出ＩＢＤＶ。感染鵪鶉未能獲得成功。
6.診斷根據IBD的特征性症狀和肉眼病變，比較容易地作出初步診斷，但對可疑病例或 混合感染，常需分離和鑒定病毒。(1) 病原的分離和鑒定① 樣品采集〓通常選擇法氏囊和脾組織。其它器官也含有病毒，但病毒量低， 可能隻有在毒血症時病毒含量有所增加。在病的早期階段（感染後3～6天），IBDV 能從大多數淋巴組織中分離到，考慮到本病呈急性經過，感染持續期短暫，分 離病毒就應至少采集5個臨床感染的雞，病料凍結貯存。如果選擇法氏囊分離病 毒，應注意法氏囊可能被呼腸孤病毒或腺病毒等所汙染，使得鑒定過程複雜化 。② 雞胚接種〓最好選擇9～11日齡SPF雞胚，接種CAM。雞胚通常在接種後3～5 天死亡，胚體病變如前述。此法是目前公認的分離病毒的最敏感方法，成功率 高於細胞培養。③ 細胞培養〓常用CEF和BGM70，可產生細胞病變，如將野毒先通過雞胚適 應後，再接種細胞培養物，則可提高分離率。考慮到IBDV在B淋巴細胞內複製， 選用來源於法氏囊的原代細胞或B細胞源的傳代細胞係分離效果好。細胞內增殖 的病毒可用免疫熒光和電鏡方法檢測，這對於IBDV的早期診斷和鑒定有很大價 值，同時也可用於鑒定IBDV的血清型。此外，還可應用IBDV核酸探針檢測IBDV分離株和直接確定組織內的IBDV。Jackwood 等（1990）報道IBDV探針在斑點雜交中不僅能檢出大約10ng的IBDV RNA，還可 檢測IBDV血清Ⅰ型的5個不同亞型和2株血清Ⅱ型病毒基因組RNA。[BT4](2) 免疫學鑒定① 瓊脂擴散試驗〓此法簡便快速，在感染後5～6天即能檢測到病毒抗原，取 病雞法氏囊製作懸液（1∶2～5），離心取上清，再用特異的高免血清（單抗） 按瓊擴法常規進行。本法亦可用已知抗原測定康複雞群的IBDV群特異性抗體，即 將感染後3～4天的法氏囊勻漿（1∶2）反複凍融（3次）離心後製成診斷抗原， 檢測血清中的抗體。早在感染後7～10天直至感染後1年以上均能測到沉澱抗體 。② 熒光抗體技術〓此法可快速檢測抗原。取病雞的法氏囊組織作觸片或冰凍切 片，用特異的熒光抗體染色鏡檢。為降低非特異性熒光，可先將熒光抗體用SPF雞 的法氏囊勻漿吸收處理。③ ELISA〓雙夾心抗體ELISA檢測IBDV抗原是快速、敏感和特異的血清學方法 ，若用抗IBDV的單克隆抗體包被酶標板來捕捉IBDV，則敏感性和特異性更高。 目前，普遍使用ELISA方法評價雞群內的IBDV抗體，尤其適用於較大規模的血清－ 流行病學調查。ELISA商品試劑盒具有方便、重複性好、結果一致等優點。④ 中和試驗〓隻有中和試驗能夠鑒定不同的IBDV血清型，區分IBDV分離株之 間的抗原差異。常用細胞適應毒在CEF上進行微量中和試驗，即用培養液將待測 血清作2倍稀釋並加到含有培養24小時融合生長的單層CEF的96孔微量細胞板上 ，每孔用1 000個蝕斑形成單位（pfu）的病毒接種細胞，37℃培養5天。培養後 除去生長液，並用10%緩衝福爾馬林衝洗5分鍾，傾去福爾馬林鹽水，細胞用1% 結晶紫進行染色。以抑製細胞病變的最高血清稀釋度的倒數來表示中和效價。⑤ RNA電泳〓取病變法氏囊或感染雞胚的組織乳劑以及感染細胞培養物，用SDS處理，苯 酚－氯仿抽提後，進行電泳，常可顯出２條清淅的帶。具體方 法參閱本書第十九章輪狀病毒節。
7.免疫由於IBDV在外界環境中較為穩定，采取消毒和隔離措施來控製本病不易達到目 的。主要的防製方法是接種疫苗。有數種弱毒疫苗可供應用，這些疫苗一般分 為高度致弱的“溫和型”疫苗和中等毒力的”中間型“疫苗，後一種疫苗目前 較為常用，因為高度致弱的IBDV毒株，對帶有母源抗體的雛雞，不能很好地誘 導免疫力。考慮到雞群被動免疫水平差異較大，且難以檢測，一般做法是在3周 齡時給所有的雛雞滴眼或飲水免疫IBDV活疫苗。鑒於抗原變異株屢有發現以及近來某些國家和地區出現高病原性或超強毒IBDV （vvIBDV），采用變異株的滅活疫苗是可取的。美國等國家已研製出致弱的IBDV 變異株，對雛雞安全，能刺激雞體產生保護性免疫應答，抵抗變異株和標準的 血清Ⅰ型IBDV野毒的攻擊。由卵黃囊獲得的母源抗體能夠保護雛雞抵抗IBDV的早期感染和防止由本病毒引 起的免疫抑製。抗IBDV的母源抗體半衰期是3～5天。因此，如果了解雛雞的抗 體滴度，就能預測雞對IBDV的易感年齡。通常是給母雞注射油乳劑滅活疫苗，刺 激機體產生高水平的母源免疫力，以使保護雛雞達4～5周。而活疫苗免疫種雞 ，產生的母源免疫力隻能保護雛雞1～3周，同時也要考慮到IBDV的獲得性免疫 能幹擾主動免疫反應。值得注意的是IBDV感染的免疫抑製作用。Allan等和Faragher等首先報道了IBDV感染的 免疫抑製作用。受到感染的1日齡雛雞對新城疫病毒 的抗體反應抑製作用最大，IBDV感染7日齡雛雞後呈現中度的抑製。免疫抑製不 僅表現為對疫苗的反應，而且對多種疾病如包涵體肝炎、球蟲病、馬立克氏病 、出血性再生障礙性貧血症和壞疽性皮炎、傳染性喉氣管炎、傳染性支氣管炎 、雞傳染性貧血因子、沙門氏菌病和大腸杆菌病等更易感。因此，在使用中等 毒力的疫苗時，應避免在幼齡期接種高度易感的雞群。熒光抗體檢測證實病毒主要在法氏囊的不成熟或前體B淋巴細胞內複製，而在胸 腺、脾、淋巴結的淋巴細胞內增殖不明顯。IBDV的感染，損害體液和局部免疫係 統，從而導致以體液免疫抑製為主的免疫失敗。 由於Vp2在誘導產生保護性免疫應答方麵起著十分重要的作用，為ＩＢＤＶ 基因工程疫苗的開發展示了廣泛的前景。已建立的Vp2單克隆抗體能被動地 保護雛雞。將編碼Vp2的cDNA序列插入到禽痘病毒基因組中，用來免疫 幼雞，當遇到強毒ＩＢＤＶ攻擊時，Vp2在體內的表達能保護幼雞免於死亡 ，但不能保護法氏囊不受損害，Vp2亦能在酵母細胞表達。
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