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耐鹽蘆筍的組培快繁技術研究一



錄入時間:2009-7-2 10:47:15 來源:青島betway必威西汉姆联

摘要:東營市農業科學研究所立足於黃河三角洲實情,以新萌發的蘆筍嫩莖為試材,研究不同激素組合對誘導蘆筍莖段愈傷組織的影響、對細胞胚的影響試驗及對細胞胚的優化誘導試驗,培育出2 個耐鹽能力強、產量高、品質優,適合廣大鹽堿地區種植的耐鹽蘆筍係號,開發前景極好。
關鍵詞:蘆筍;組織培養;快速繁殖;鹽堿地
蘆筍又名石刁柏,是百合科天門冬屬植物,其嫩莖是人們喜食的蔬菜,營養價值高,並具防癌、抗癌作用,國際市場暢銷不衰,是高效創匯作物。東營市農業科學研究所立足於黃河三角洲實際,培育出2 個耐鹽能力強、產量高、品質優,適合廣大鹽堿地區種植的係號,開發前景極好,為了加速其推廣繁殖,並為進一步深化育種進行技術儲備,對耐鹽蘆筍的組培快繁技術進行了研究,試驗取得了成功。
1
材料與方法
1.1
試驗材料
3
5 月份取新萌發的耐鹽蘆筍嫩莖。
1.2
外植體處理
嫩莖剪回後,先用自來水衝洗2~3 遍,再取1 1.5 cm 長的莖尖,4 min 之後,用無菌水漂洗4 5 次,最後用無菌濾紙吸幹水分。
在超淨工作台上用75 %的酒精浸20s,再於0.1 % HgCl2 溶液中消毒,消毒後的蘆筍外植體在接種前還須用無菌剪刀剪去舊切口,創造一個新切口,以利於脫分化過程中養分的吸收。
2
脫分化試驗
2.1
培養條件
溫度(27 2 )℃ ,光照強度1 800lx ,光照時間每天12h MS培養基十蔗糖(30g/L) +活性炭(0.5 mg/L ) + 激素,培養基的滅菌:1210.1 0.14kP 17 min 高壓滅菌。
2.2
試驗設計
如表1 ,將處理好的蘆筍外植體接種於表l 所列培養基中,觀察愈傷組織生長情況,接種10d 後,莖段均能輕度膨大,15d 後除Ll 外均能產生少量愈傷組織,25d 後,除L1 外均能產生較多愈傷組織,但L7 L8的愈傷組織有輕度的水漬狀,也略顯鬆散,L3 L4形成的愈傷組織質量較好。
3
體細胞胚的誘導及增殖
3.1
體細胞胚的誘導
由於在愈傷組織分化成叢生芽的過程中,叢生芽的形成不僅取決於激素的濃度,還取決於2 種激素的相對比例,蘆筍愈傷組織體細胞的誘導,以MS 為基本培養基,蔗糖30 mg/L ,活性炭0.5g/L ,取細胞分裂素BA濃度為0.5 1.0 1.5 2.0 mg/L,生長素NAA 濃度為0.0 04 08 1.2mg / L ,安排試驗,選取培養好的愈傷組織移植於上述方案配置的培養基中,觀察叢生芽分化情況。
愈傷組織接種10d 後,開始出現淺綠色瘤狀突起,20d 後逐漸伸長產生叢生芽,但是不同的激素濃度及配比的分化率和叢生芽數不同。從表2 可以著出,分化率和叢生芽數較高的試驗分別為10 號和14 號,由於分化率還不夠理想,又圍繞10 號和14 號對激素濃度進行了調整(見表3 )。結果表明,適宜蘆筍愈傷組織分化成芽的激素濃度分別為BA1.8mgL , NAA 0.2mg / L ,因此可以認定MS + BA 1.8 mg / L NAA 0.2mg / L 十糖30g/L十瓊脂5.8g/L+活性炭0.5g/L,是蘆筍最佳分化培養基。

 

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