耐鹽蘆筍的組培快繁技術研究二
錄入時間:2009-7-2 10:47:58
來源:青島betway必威西汉姆联
3.2 繼代培養
由於愈傷組織分化的蘆筍不定芽生長迅速,5 周左右平均高可達6.0 cm ,需要進行繼代培養,繼代培養時將蘆筍莖剪成1 一2 cm 長的莖段,水平放置到培養基的表麵,最初的繼代培養以MS + BA 1.8mg / L + NAA0.2 mg / L 十糖30g/L十瓊脂5.8 mg/L +活性炭0.5g/L,既可實現高增殖率,又能保證分化出的芽粗壯,生長較好。培養室溫度保持在25 一30 ℃ ,空氣相對濕度60 % ,光照強度1 800lx ,光照時間每天12h , 40d 左右便可以繼代一次,每次繼代增殖倍數達6.8 倍。因此從理論上來講,由一個蘆筍莖段開始培養,培養周期為40d ,年增殖次數為9 次,每周期增殖倍數為6.8 ,那麽la 後可獲得蘆筍莖段3.1 x 107個,這個繁殖速度大大超過了蘆筍的有性繁殖速度。
實踐中發現,蘆筍經過長期的繼代培養,容易產生玻璃化的現象,一般通過降低培養溫度,延長光照時間,降低激素濃度等方法,可使玻璃化程度緩解,特別是把BA 濃度降為1.6 mg/L , NAA 濃度降為0.lmg / L 時,既能緩解玻璃化程度,又能保證增殖倍數,課題組曾嚐試通過變換激素的辦法來消除玻璃化,如把NAA 換成IBA 及2 , 4 一D ,但未能成功,IBA 與2 , 4 一D 甚至有加重玻璃化的趨勢。根據試驗,在蘆筍的長期繼代培養過程中,最好每隔一定時間,如2a ,重新構建一次再生體係,以保證蘆筍組培苗的健康增殖。
4 生根培養
4.1 根的誘導
將繼代培養成的小苗,剪切成2 一3 cm 的帶芽莖段,轉人生根培養基中進行生根誘導,生根培養基選用1 / 2 入侶為基本培養基,附加不同濃度的激素,通過試驗評選出較優的生根培養基(見表4 )。
結果表明,經過繼代培養的蘆筍幼苗莖段在1 / 2MS + BA 0.02 + NAA 0.1 的培養基中,培養40d ,生根率可達71.4 %。另外,在耐鹽蘆筍多倍體誘導試驗中發現,添加秋水仙堿的培養基中,蘆筍試管苗生根率普遍高,這還有待於進一步的試驗證實。
4.2 練苗及移栽
練苗:經過生根培養的蘆筍,當根長達到2 cm 以上,並有少許側根長出時便可進行移栽,但為了提高成活率,在移栽前要先進行練苗,方法是揀取根係完整,植株健壯的蘆筍組培苗,打開培養瓶,讓蘆筍苗暴露在空氣中,並置於全日照下,在上午9 : 00 至下午16 : 00 用50 %的遮蔭網適當遮蔭,練苗3 一5d 後,將組培苗從瓶中取出,並用大量自來水衝洗幹淨根部附著的培養基,然後移植到配好的營養土中。
營養土的配置:選用腐殖土或草炭土為基質,按體積比1: 1 混入細砂,移栽前用1 / 800 的多菌靈溶液消毒。
管護:試管苗移栽後,要進行適當遮蔭、保濕。另外由於試管苗的根吸收養分的能力比較弱,因此為了提高試管苗的移栽成活率並促進其健壯生長,在移栽後當天可結合澆水噴灑一遍1 / 4 的大量元素,以後每10d 噴灑一次,當試管苗根莖部抽生出1 一2 條新莖時,便可進行大田定植。試管苗從開瓶練苗到大田定植這一過程,約需30d ,成活率可達85 %以上。
5 結論
由於試管苗在接近理想的條件下生長分化,已不受季節限製,有人為提供的外源植物激素的促進,增殖的速度很快,加之配套有效的育苗移栽技術,完全可以使蘆筍的年出苗率達到一個理想的水平,以滿足生產所需。因此,微體快繁技術的成功有利於迅速增加雜交組合中純合父母本的數量,縮短育種周期;對於耐鹽蘆筍新品係的前期快速繁殖推廣也極有意義。
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