國內外牡丹組織培養技術研究現狀三
錄入時間:2009-7-2 15:41:13
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2.25 牡丹組培過程中產生玻璃化現象的研究
1992 年河南師範大學的儲成才、李大衛首次報道了組培中產生玻璃化現象，並對其產生原因做了初步觀察。實驗中發現：NAA 、6 一BA 等單獨或相互作用均不會誘導牡丹玻璃苗的產生；溫度的高低與牡丹玻璃苗的產生有很大的相關性，在26 ℃ 以下沒有玻璃苗的產生，在26 一30 ℃ 卻有63 ％的牡丹苗發生玻璃化現象，隨溫度的升高，玻璃化產生的頻率也升高。
2.2.6 牡丹組培過程中防止褐化的研究
褐化問題是牡丹組培過程中的重要瓶頸之一。北京林業大學李萍等人研究了活性炭、硝酸銀、PVPP 和VC4 種防揭劑對牡丹品種‘烏龍捧盛’組培中褐化控製的作用及對組培苗生長和增殖的影響。結果表明：褐化集中發生在轉接後4d 內。活性炭能有效控製褐化，但長時間處理會抑製組培苗的生長和增殖；繼代培養初期在含活性炭2.0g/L的培養基中進行4d 短期處理，不僅能有效控製褐化，還在一定程度上促進了組培苗的生長和增殖。硝酸銀1.0 一8.0mg/L能明顯減輕褐化，其中10mg/L的效果最好並能顯著促進增殖；8.0mg/L時組培苗生長量最大。PvPP能部分控製褐化，1.0g/L效果較好；低濃度的PVPP 促進組培苗生長，高濃度時促進增殖。VC 控製褐化的效果不佳，且易導致組培苗玻璃化。綜合分析認為：牡丹品種‘烏龍捧盛’繼代轉接時，先在添加活性炭2.0g/L的培養基中培養4d ，然後轉人不含活性炭的培養基中，能有效控製褐化和避免活性炭對生長和增殖的負麵影響；在培養基中加人硝酸銀2.0 mg/L,能在有效控製褐化的同時，促進組培苗生長與增殖，推薦在牡丹組培中應用。
3 國外組培技術研究進展
3.1 禽傷組織培養
在國外最早的有關牡丹組培方麵的報道partanen及Demoise 和Partanen ( 1969 ）關於愈傷組織的培養，他們通過從牡丹種子剝離的合子胚誘導出愈傷組織。cildow 和MiteheU 用牡丹白化莖為外植體進行組織培養，比較了2SH 和SH 一M 兩種培養基的效果，發現含有還原態氮和氧化態氮的SH 一M 培養基更利於愈傷組織的快速生長。
3.2 有關胚培養的研究
為了改變牡丹種子休眠的習性．國外學者進行了胚培養的研究。據Gildow 和Mitchell 用牡丹白化莖為外植體進行組織培養，比較了ZSH 和SH 一M 兩種培養基的效果，發現含有還原態氮和氧化態氮的SH 一M 培養基更利於愈傷組織的快速生長。Wang and van Staden 報道，2 , 4 - D 能促進‘鳳丹白’種胚的子葉兩端形成愈傷組織。陳怡平等以紫斑牡丹土芽、葉柄、葉片、心皮和雄蕊為材料進行愈傷組織培養，發現愈傷組織誘導中，NAA 的作用大於BA 的作用洲AA 濃度稍高於BA 濃度比較理想；土芽和頂芽的誘導率最高，適合作外植體。牡丹組培中，誘導產生愈傷組織比較容易，而由愈傷組織分化不定芽卻比較困難，不定芽分化率一般比較低和Mey報道，胚的離體培養可以將萌發時間縮至84 一98d 。Brukbin 和Batygina ( l994 ）用處於不同生長時期的P.anomala 種胚為外植體進行胚培養，發現隻有選球狀胚階段之後的胚狀體培養才能增殖，取自成熟種子的胚在無激素的MS 和112MS 培養基上均能形成正常的小植株。Julie , Buchheim 等（1994 ）研究GA 3 , ABA , BA對上胚軸的影響，結果表明：GA3 促進上胚軸的生長，ABA 和各種濃度的GA3 配合使用均抑製上胚軸的生長；GA3 和BA 交互作用利於芽的生長；高濃度的GA3 和BA 能生成大量正常的葉片。此外，GA3 能打破上胚軸的休眠，在不含細胞分裂素的培養基上發生的根細長，且有側根。
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