哺乳動物呼腸孤病毒
4 培養呼腸孤病毒可在許多種類的培養細胞中增殖,包括原代猴腎細胞、KB細胞、HeLa細胞、人羊 膜細胞以及L細胞等,並於7~14天內產生細胞病變,主要是在感染細胞內形成嗜伊紅性胞漿 內包涵體。這些包涵體特征地形成於胞核附近的胞漿內,並在感染過程增進時散布於整個胞 漿內。電子顯微鏡檢查,可在包涵體內看到完全和不完全的病毒粒子。這些病毒粒子經常呈 結晶狀排列,並常連結於胞漿內的梭形微管上。感染細胞最後崩解,病毒被釋於細胞外。不同於禽呼腸孤病毒,哺乳動物呼腸孤病毒雖可在雞胚內增殖,但不呈現規律性。來源於人 的呼腸孤病毒株通常不能在雞胚卵黃囊內增殖。正呼腸孤病毒在L細胞內的增殖過程已被充分研究。於37℃,接種入的病毒可在30分鍾內吸 附65%。病毒借細胞吞飲作用侵入細胞。吞飲泡與溶酶體融合而形成吞噬體。電子顯微鏡觀 察,常可在這種吞噬體內見到完整的病毒粒子。病毒粒子的外衣殼由溶酶體的水解酶除去, 剩下“亞病毒顆粒”,亦即核心。核心中的轉錄酶和帽化酶原來呈“不活動”狀態,此時因 外衣殼的除去或改變而被激活,從而由某些雙股RNA片段轉錄出單股的mRNA。另一些雙股RNA 基因節段則隨早期病毒蛋白合成而受到抑製,母代的雙股RNA繼續保留,在獲得蛋白外殼後 可以重新成為完整的病毒粒子。新轉錄出來的單股mRNA既是新的雙股RNA的合成模板,也是 病毒蛋白質的合成模板。這些未帽化mRNA能優先合成大量的病毒結構蛋白。這些雙股RNA是 在複製酶的幫助下由新複製的單股RNA組合而成的。病毒粒子的最後裝配,就在胞核周圍的 胞漿內進行,並如上述,常常連結於梭形微管上。正呼腸孤病毒的一個特點,就是在沒有脫去內衣殼的病毒核心內,就能進行部分轉錄過程。 每個病毒核心含有許多酶活動點,初期的mRNA分子即由此釋出。
[BT4]5. 病原性鼠類能發生3型呼腸孤病毒的自然感染,有時稱肝腦脊髓炎,其臨床表現為黃疸、運動失調 、油性被毛、生長發育遲緩等。給乳幼鼠作滴鼻感染,也可使其發生呼吸道疾病而死亡。將 1型呼腸孤病毒給小鼠作腹腔內接種,可於5~7天內致死,並可由死亡小鼠的各器官分離到 呼腸孤病毒。對新生倉鼠、雪貂、大鼠也會引起同樣病變。將3型病毒直接注入乳鼠腦內, 可以使其發生壞死性腦炎和死亡。剖檢中樞係統,可見病毒主要在神經原細胞內增殖,膠質 細胞和室管膜細胞內顯然不發生病毒增殖。此外,呼腸孤病毒對大鼠、小鼠還有致畸變作用 。1和2型呼腸孤病毒感染小鼠,病毒可通過懷孕鼠的子宮垂直傳播,致胎兒或新生 兒死亡。其它哺乳動物和人的呼腸孤病毒感染大多呈無症狀經過。第1株牛呼腸孤病毒是由健康牛的糞便中分離獲得的,至今已分離到50多個牛呼腸孤病毒株 ,包括1、2、3等三個血清型。1型最為常見。在某些國家的牛群中,陽性抗體率達57%。一 般認為,牛在一歲以內普遍發生呼腸孤病毒感染,但不出現症狀,牛在發生呼吸道疾病後, 呼腸孤病毒抗體的效價經常上升。1型與2型混合感染對牛地方性支氣管肺炎的流行起重要作 用。給牛作呼吸道感染試驗,雖然沒有症狀,但肺和其它組織中含有高滴度病毒,鼻液中也 出現病毒,隨後則可測出血清中較高 效價的抗體。給不吃初乳的新生犢牛作人工感染,常 可產生輕微的肺炎病變,但不象組織培養細胞那樣形成胞漿內包涵體。馬呼腸孤病毒的3種血清型均有發現,調查表明其抗體陽性率分別為1型29%,2型19%,3型 61%。1型與3型可致馬上呼吸道疾患,此外還可與馬流感病毒一起引起咳嗽綜合征。綿羊也存在3個型的呼腸孤病毒,但抗體檢測以3型為主。用豬株呼腸孤病毒給6周齡幼豬作經鼻接種,幼豬體溫升高,血清中的血凝抑製抗體可增高4 倍以上。犬呼腸孤病毒隻分離到1型,2型與3型的抗體亦有陽性。用1型實驗感染幼犬時發生間質性肺 炎,抗體效價上升。貓呼腸孤病毒分離率最高的是3型,人工感染可致溫和的呼吸道症狀。1型是從貓的腫瘤細胞 中分離所得的。人類的呼腸孤病毒感染十分普遍,3種血清型均有發現,血清學調查的陽性率很高,最重要 的是1型,但大多呈無症狀經過。曾從普通感冒、腦炎、肝炎、腦膜炎、腦脊髓膜炎以及致 死性肺炎患者體內分離到不同血清型的呼腸孤病毒。
[BT4]6. 診斷和防製應用敏感的組織培養細胞從發病早期的糞便、呼吸道分泌物、滑液或其它組織樣品中分離病 毒。為消除細菌和其它病毒的幹擾,應視情況先將病料作50~55℃加熱或用乙醚、丙酮處理 。根據特征性細胞病變——核周圍包涵體的出現,人工感染乳鼠致病,初步判定病料中是否 有呼腸孤病毒存在。應用已知抗體進行鑒定:先以補體結合反應檢測群抗原,隨後再用中和 試驗或血凝抑製試驗檢測型特異性抗原。鑒於症狀及病理剖解變化都不具特征性,診斷通常有賴於抗體的檢測,現症病例的診斷,則 需發病期及康複期的雙份血清。ELISA的敏感性遠遠高於瓊脂擴散和間接血凝試驗,以純化 病毒為抗原,並且用高嶺土處理血清,以排除非特異性反應,其結果與中和試驗一致。對某些由呼腸孤病毒參與所致的疾病,可用滅活的呼腸孤病毒與其它抗原混合而成的聯合疫 苗進行預防。
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